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绵羊MBL基因多态性与支原体性肺炎相关性研究 摘 要 一、绵羊MBL的克隆及序列分析 增得到一特异性片段，经回收重组到pBS—T载体，筛选阳性克隆，测序。结果如下： (1) 复序列后出现了两个氨基酸的间隔，分别是亮氨酸和精氨酸。 (2)不同物种间在MBL基因核苷酸序列上有较高的保守性，所得无角陶塞特羊MBL与牛、人、 恒河猴、猪、马、小鼠、丈鼠、鸡MBL．C以及牛MBL．A核营酸序列同源性大小分别为： 96．8％、85．7％、85．7％、84_4％、83．1％、81．2％、8l 的高度保守区。 二、绵羊MBL基因多态性与支原体性肺炎相关性研究 MBL作为人类天然免疫系统中重要的一线抗感染分子，已表明与多种疾病相关，如一般免疫缺 性肺炎是由绵羊肺炎支原体所引起的一种特异性感染疾病。本实验中，选取无角陶塞特羊40只、萨 分析实验一得到的绵羊MBL序列，选取AluI和BssTl 进行多态性分析。同时用间接血凝实验检测四种绵羊肺炎支原体的感染情况。采用DPS统计软件进 行数据处理，分析绵羊MBL基因多态性与肺炎支原体感染的相关性。结果如下： (1) I酶切位点共检测到四种基因型iAA、 无角陶塞特羊、德克塞尔羊、萨福克羊、湖羊在Alu 型，A等位基因是优势等位基因。 (2)Alu 而德克塞尔羊、萨福克羊已达平衡。多态信息含量(Pfc)检测德克塞尔羊和萨福克羊处于 低度多态，无角陶赛特羊和湖羊处于中度多态，咀湖羊最高。 (3)肺炎支原体感染检测结果：湖羊阳性率最高，萨福克羊最低；湖羊的阳性率显著高于无角陶 塞特羊和萨福克羊，而与德克塞尔羊差异不显著；德克塞尔羊、无角陶塞特羊、萨福克羊之 间差异不显著。 (4)Alu AC基因型绵羊。表明AA基因型在适应性力面具有遗传优势，对其深入研究将有助于揭示 其作为分子育种标记的可能性。 (5)BssTl 关键词：绵羊，MBL，克隆，支原体性肺炎，基因多态性 论文研究类型：A(基础研究) 绵羊MBL基因多态性与支愿体性肺炎相关性研究 Abstract 1．The and of MBL analysis cloningsequencing sheep was to the theDNAwasextracted Inthe MBLinwhich study,PCR techniqueappliedamplifysheep ofPollDorset wasextractedand the fromblood sheep．-Thetargetfragment byusing purified kitthenclonedintoPBS—T recombinantwas and vector．Consequently,theplasmidamplified the and the ofDNA resultswereasfollows： fromtrailsfotruantteStedinserting fragment．The 549bp，includingexonl(47bp)、exon exonland2 (1)Thefragmentwas coded5taminoacidsinwhichtherewere16