苜蓿花药培养预理方法和培养基的研究.pdfVIP

摘 要 苜蓿是重要的饲草作物，同时在水土保持方面发挥着重要的作用。花药培养可以在 短时间内获得加倍单倍体纯系，缩短育种年限和提高选择效率。 为了提高苜蓿花药培养效率，以小孢子发育处于单核中期到单核靠边期的苜蓿花药 为材料，对花药培养预处理方法和培养基进行了研究，建立了苜蓿花药培养高效再生体 系。试验结果如下： min，70％ (1)苜蓿花药培养适宜的灭菌方法是将花蕾用自来水流水缓慢冲洗30 酒精浸泡灭菌2s，接着用O．1％升汞溶液浸泡灭菌4m．m’最后用无菌蒸馏水漂洗5次。 (2)接种前花蕾经4℃低温预处理有利于提高花药愈伤组织诱导率，其中以预处 理3d的诱导率最高。 (3)采用固液双层漂浮培养比固体培养和液体漂浮培养诱导效果好。接种密度以 每个50 2．O O．5 2，4一D mg，L和6-BAmg，L，麦芽糖6％～9％的苜蓿花药愈伤组织诱导率较高。 糖1．5％的绿苗分化率较高。 (5)培养基中附加水解酪蛋白700 m昏亿或谷氨酰胺700m昏见或脯氨酸600mg见 对愈伤组织诱导和绿苗分化都是有利的。 (6)生根培养基为l／2MS附加l％蔗糖。 关键词：苜蓿；花药培养；愈伤组织；再生体系 ABSTRACT tlle fodder绷dw栅卸d∞ilco舾eⅣ撕0n moSt pl锄t· importallt Alfalfa(朋反比卿跚疗岫L．)is ill f如m chmmosomes AntllercultIIm micmsp0溺，bydoubling ofalfal风togeI把ratehapIoidpl锄ts poUen linesinaShort a ispo船ible协ob培incompletclyhomozygous time。therebyproviding haploidpl锄坞il methodf|or theseIection up柚dmre鹊ing efficiency． speeding was wereiIlthcmiddle AmhercultLlrc0falfmfaexpememed晰tllIIlicrospores intheside of the smgleⅡucleus，toilllprovc s诅ge觚d，or developnlent髓age developmem a11ther maillresults culture werc邪following： ef五cieIlcy，The waterfor30minucesand iIl70％ethaIlolfor2 (1)Flowerbud