西瓜种质sra分析及离体诱变突变体的分子检测.pdf

摘 要 西瓜 (Citrullus lanatus)是一种世界性园艺作物，具有较高的食用价值和医疗保健 价值，是深受人民喜爱的水果之一。西瓜遗传资源丰富以及资源的创新对于西瓜育种 尤为重要。 本研究运用SRAP 分子标记技术对80 份西瓜种质资源的遗传多样性进行分析， 并以组织培养技术为辅助手段对化学诱变的西瓜京欣一号父本进行 AFLP 分子标记 技术进行突变体分子筛选。主要研究结果如下： 1. 运用28 对引物组合共扩增出308 条带，其中多态性条带68 条。引物组合的 多态性频率最低为9.1% ；最高为45.45% ，平均多态率为22.08% 。不同引物组合扩增 出的谱带差异反映出不同品种间的遗传差异。 2. 对80 份西瓜种质资源进行聚类分析，在阈值取20 时，可将80 个品种划分为 2 个类群。类群I(WGI)包括23 个品种，类群II(WGII)包括其余57 个西瓜品种。阈值 取13 时WGII 划分为两个亚群。其中WSG1 包括18 个品种,WSG2 包括39 个品种。 3. 根据遗传距离矩阵，计算了80 个品种间的遗传距离，其变化范围为0～15, 平 均遗传距离为4.66 ，其中4 号、31 号和32 号与其他品种的平均遗传距离分别为10.1、 9.16 和8.08。说明这3 个品种与其他品种的遗传差异较大，而其他的品种间的遗传差 异较小，西瓜品种的遗传基础狭窄。 4. 以MS 培养基为基本培养基，添加BA 1.0mg/L 和IAA 0.5mg/L 时为最佳不定 芽诱导培养基，添加0.1mg/L KT 为最适合的不定芽伸长培养基，添加NAA 0.2mg/L 的1/2MS 培养基为最佳生根培养基。 5 ．利用15 对AFLP 引物对54 个诱变单株进行了检测，引物E41M49 在 11 号 和38 号两个单株上检测到差异条带，其片段长度分别为240bp 和250bp 左右，从分 子水平上对EMS 诱变突变体单株进行了筛选。 关键词：西瓜；诱变；AFLP ；突变体 The Analysis of SRAP of Watermelon Germplasms and Molecular Screening in Watermelon Vitro Mutation Graduate: Cheng Yongqiang Supervisor: Prof. Duan Huijun Abstract Watermelon (Citrullus lanatus), originating in the African savannah, is a world-wide horticultural crop. Because of its high food value and health value it has been one of favorite fruits. It is very important to enrich and create the watermelon genetic resources. Genetic diversity of 80 watermelon materials were analyzed using SRAP and the mutations of Jing xin No.1 male parent were detected using AFLP by tissue culture technique as assisted measure. The main results were as follows: 1. By genetic diversity analysis. The results showed that 308 AFLP bands were amplified using 28 primer pairs, among them