越橘离体培养诱多倍体技术研究.pdf

越橘离体培养诱导多倍体技术研究 摘 要 本试验遴过歉水稻素对越橘组墙茁和愈伤组织诱变、越橘花药离体培养隧及离体 培养糖精后代倍洼鉴定，鼹究了越橘离体港养诱导多倍钵技术，获得了倍性敬合体后 代，为培弯越撬多倍{本囊品静羹定了基撼。主要磊秀究结暴螽下： l，逶过人工诱变手段蓄次对褒体培养越撬多倍钵诱导方法遴行了研究。‘美鼗’、 ‘达渠’鄹‘埃利奥特’3个晶耪离{奉叶片农黠攘不同浓度zT、2，4国帮CPPu韵 wPM培募基中，均毒效地诱导照愈伤缎织。其中‘埃裂奥特’在wPM+藏糖30 2。o ITl班+CPpu m酽一璩滕7g九的壤葬基孛愈伤组织诱嚣率迭90％以上，霉生搴达 73．9％。将这3个品种的愈伤组织经O％．O。2％牧水他絮浸渡处理6h、12h秘24h菇， 2+G 愈伤组织竭交死亡现象严重。‘埃利奥特’离{本叶片农WpM+zT mg几+COLo。。2。 培养熬上诱导产生的愈伤组织中多倍体细胞比例占34，3％。 采用浸渍法或药齐q培养基法对越橘试管萤茎段进行诱导多倍体结果表明：药刹培 养基法效果不如没渍法。用秋水仙索浸渍处理上述3个品种的单芽茎段后，试管菌的 存活率和变异率与秋水仙素浓度和作用时间有关。用O．05％秋水仙素溶液浸渍处理 24h时，3个鼎种平均存活率为42．9％，变异率5．7％。在0．1％秋水仙索溶液浸渍24h 的处理中，3个品种平均存活率降低到20．9％，变异攀上升到17．2％。而在o．2％秋水 仙索溶液浸渍24h处理中，3个品种平均存活率和变异率又降低，均为9．9％。说明一 定处理时间条件下，黼着狱永仙素浓度的增加，菌的存活率下降，而变异率高低与秋 永佃素溶液浓度不完企里芷楣关。高浓度诱导处理也会出现变异率下降的现象。另外， 爵种之澜对积水伯素的敏感稽度菔应不一，诱导加倍效果亦不同。其中用o．1％秋水 稔素溶液浸溃‘遮柔’试管蕾攀段24h箍理酶诱交效条最好，存活率28．9％，变异率 22，6％，均高予‘埃剃突特’藕‘美登’。时细胞铬性鉴定缩栗表胡，多数诱交株系为 二倍钵缩脆帮圈结体缩胞共存静嵌合体，其中二倍体缁胞平均占794％，谣倍俸细胞 平均占20．6％。 o．5 2．营次辑究了越祷藐药愈傍缝绞诱导及培养阕麓。采爝wpM+BA m∥乙 l +2，4．D0翔影L培养蒸残凌遗诱导密了8令越橘晶释花药意伤缀缆。箕中‘j0里’花 药愈俊组织诱导率最囊，达18．O％。焉单独捷鼹z}1．孬o omg纯或GpP稚1．G一4．0狲蛾。 对越撬菇药脱分化不起终瘸。捡测结粜表明诱导出魏藐药愈侮缀绞必攀倍俸、二倍体 积四供{誊的嵌台体。花药愈馋缀织在分化壤养基上趣泰获得霉分纯撞株。 3。对离体培券几十代至露代熬‘je隧’墨曩‘蓬丰’越壤缀壤萤倍性鉴定及其在 瞬间生长情况调套结果表明，采厢无菌短枝型繁殖的越橘组培苗倍性稳定。证明组织 培养途径可戳用于越橘品种保存和工厂化育荫。 2 4．越橘试管苗在1稼w孙蘑+IBAO mgm+活性碳1班培养基中生根率达95％。 500 采甭速蘸生挺荆糟A m彰L蓐，孬接入1，2、种M培养基中的二步生根法，生根率 达爨77，5％。解决了魑橘缀培蓠试管肉生穰潞酌瓣题。为采甭根失压片技术签定越橘 缀培嫠染色{零倍憔餐造了毒秘条件。 慕。簧次将凌式缁胞分析仪测定DNA含垂方法糯予越橘倍敬鉴定。流式缅胞分 攒仪测定DNA含量方法与棂尖篷-专方法检测结巢一致。 6．袋甩滚式缨腿仪瓣倍性不明确懿‘芝娓’、 ‘j￡翌’、 ‘j￡潞’、 ‘圣云’ 秘‘蓝丰’5个越撬熙秘的检测绩果涯明，上述熬穆瓣为二僚体。