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家蚕表达猪繁殖呼吸综合征疫苗蛋白e和m的研究
目录
中文摘 要 ……,……3
A B S T R A C T…… ,… …,……4
第一章 家蚕 生物 反应 器 的应 用研 究进 展 ……,……6
1 家蚕 生物 反应 器 概 况 ……几……6
2 昆虫杆状 病 毒 的分 子 生物 学进 展 ……,二,……7
3 昆虫杆状 病 毒 表达 载 体 系 统研 究概 况 ……,……7
4 B ac一to一B ac 的原理 … …,……8
5 家蚕 Bac一to一Bac 系统 的发展 ……9
6 杆状 病毒 表达 载 体 的优 点……,……10
7 杆状病 毒表 达 载 体 在 家 蚕 中 的应 用展 望 ...……,……n
参考 文献 ……12
第 二章 猪 繁殖 与 呼吸综 合 征病 毒研 究现状 ……15
1 病 毒基 因组 结构 ……15
2 基 因及 其 编 码 蛋 白的研 究 ……15
2 .1 P R R SV 结 构基 因及 其 编码 蛋 白…… 16
2.2 P R R SV 非 结构 基 因及 其 蛋 白……,……19
3 高致病性致病 机 理 ……..‘……,……。……20
4 病 毒 的复制 与转 录 ……,……20
5 展 望 ……,……,……20
参考 文献 ……21
第 三 章 E 、M 基 因在 家 蚕 细 胞 及 蚕 体 中 的表 达 ……23
1 材料 、试 剂和 仪器 ……23
1.1 材料 ……,……23
1.2 试 剂 ……23
1.3 主 要 仪 器 设 备 ……24
1.4 常 用 试 剂 配 制 ……,……24
2 实验 方法 ……,……25
2 .1 热击转 化 感 受 态 细 胞 的制 备 ,……,,……,.,二,、..…,.…25
2.2 目的基 因 的获 得 … … ,… …26
2.3 重组供体质粒 的构 建·········································,·一· 27
2 .4 转化 转座 ……,……,……30
2.5 从 E 。011B m D H 10B ac 细 菌 中抽 提 大 分子质粒 ……,……30
2 .6 重 组 B m N P V B acm id D N A 的 P C R 验 证 ……犯
2.7 重 组 B m N P V B acm 记 D N A 转 染 家蚕 B M S 细 胞 ……33
2 .8 发病细胞 的收集 及 重 组病 毒 的获 得 ……34
2.9 重 组 蛋 白的表 达 检 测 ……,···.·..·················……34
2.10 重 组病 毒在 家 蚕 幼 虫 中的表达 …… ,.35
3 结果 ……35
3.1 目的片段 的取 得 ···.. ·······……35
3.2 重 组供 体质 粒 的构 建及 鉴 定 ..… … ,…… 36
3 .3 重 组 B m N P V B acm 记 D N A 的获 得 及 P C R 验 证 ……38
3.4 细胞 转 染 结果 ·.·..········.··……38
3.5 E 、M 蛋 白在 家 蚕 体 内的大 量表 达 …,…,……,.39
3 .6 重 组 蛋 白的 W E ST E R N 分 析 二,……40
4 讨 论 ……,……40
第 四章 研 究 总 结 与展 望 …,……,···········································一· 42
1 研 究总 结……,……,……,……42
2 展 望 ……,……4 2
2.1 理 想 的生物 反应 器— 家蚕 ……,……,
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