3个与奶牛乳房抗性相关基因的克隆及比较基因组学分析.pdfVIP

摘 要 乳房炎是造成奶牛业损失最严重的疾病，尽管在许多国家都广泛地实施了乳房炎防制措施， 但它仍然是世界奶牛业面临的最大威胁。研究表明，奶牛乳房炎抗性在种间和种内都存在显著的 遗传差异，通过遗传选择提高乳房炎抗性可能是解决这一重大疾病最好的长期策略。 本研究对p一防御素、AHCY、MPIF-1等三个基因进行了克隆和比较基因组学分析，旨在通过 对上述与奶牛乳房炎抗性相关基因的分析，进一步揭示乳房炎抗性的分子机理。本研究取得的主 要结果如下： 素BNBD5基因的编码序列，构建了克隆质粒。 2、牛、人、小鼠p．防御素氨基酸序列趋于中度保守，相似性74．3，一致性20．0，都属于D- 防御素超家族成员。牛B．防御素蛋白模拟结构由三个p．片层反向组成，六个半胱氨酸形成三对二 硫键稳定了p．防御素分子的三级结构。通过3D结构分析，证明牛p．防御素也是一种在上皮细胞表 面具有微生物菌落抗性的抗菌肽。 含3个保守结构域，其3D模拟结构主要由两部分组成，每个部分都是由两边的0【．螺旋包围多个 6．片层组成。 合位点等多种结构，其3D模拟结构显示MPIF．1以单体形式存在，由一个a一螺旋和3个p一片层组 成，除了具有多数细胞趋化因子都具有的4个半胱氨酸外，MPIF-1还有另外两个半胱氨酸形成的 一个二硫键。通过计算模拟结构的电荷分布，发现其具有一个明显的正电荷口袋。 关键词 奶牛，乳房炎抗性，B一防御素，AHCY，MPIF-1 Abstract Mastitis COWSisa remainsthemost diseasetothe ofdairy complexdisease，which costly worldwide the ofmastiffscontrol dairyindustry,despitewidespreadimplementation differencesofmastitisresistancebetweenbreedsandwithinbreedin COWSare dairy significant．so selectionto mastitisresistancebethebest bacauseitoffersthe genetic improve may long—termstrategy for resolutionofthis disease possibilitypermanent complexproblem． TheaimofthecurrentresearchwastoUSethetoolsof onfunctional comparativegenomics genome of COWStoisolateandclonetheirdiseaseresistancerelatinal formolecularevents studydairy genes，look andestablishfundamentalmaterialsand forfurther and selection．Themain techniques studygenetic resultsobtainedareasfollows： The usedthebloodofHosteinCOWSwithmastitis．AfterRNAfromblood experiment extracting leucocytes，We tocDNA of inGenB