ap1基因转化单倍体小黑杨及其数字基因表达谱分析.pdfVIP

摘要 IIIIIII mIIIIIIllllllllllllllllllllllllllllllll 703 摘要 Y2721 杨树是重要的工业和经济用材林树种之一，是林木研究中的模式植物。众多研究发 现杨树具有相对较长的童期，而许多性状在成年期才能表现出来。因此，促进杨树提早 开花，缩短其幼年期成为林木育种学者的研究热点。近年来，许多花发育相关基因在植 物中的成功转化，为研究人员通过基因转导技术来改造植物花期奠定了基础。已有研究 过表达的研究鲜有报道，并且杨树转基因的研究多是以杂合二倍体为基础。本实验室已 往硕士研究生通过花药培养，获得B6杨(B6杨是小黑杨雌株天然授粉而得的二倍体雄 株)单倍体植株。单倍体小黑杨继代培养多次后，体细胞染色体自发加倍，形成纯合的 二倍体，称之为双单倍体。经过长期培养观察，发现双单倍体和二倍体小黑杨外观形态 上存在差异。本论文的目的是利用实验室已有的从杞柳中克隆出的仰J基因构建植物表 达载体，获得小黑杨双单倍体和二倍体转基因植株；采用高通量测序技术分析双单倍体 和二倍体小黑杨组培苗叶片和茎尖的基因表达情况，进一步分析转基因株系的外观形态 差异的原因；含GUS基因的XVE化学诱导型植物表达载体的构建，确定双单倍体小黑 杨中能够诱导目的基因表达的最适雌激素浓度。 论文主要取得成果如下： x35S：．APl 1，构建2 PERIO植物过表达载体，获得小黑杨双单 pB2SM，35S：：GUS 倍体和二倍体转基因植株。观察转基因植株的表型：双单倍体小黑杨导入APl基因后出 现早花性状，且开花后的双单倍体小黑杨15天左右开始枯萎，凋谢至死亡；而二倍体 小黑杨并无早花现象。 2，双单倍体和二倍体小黑杨组培苗数字基因表达谱测序，分析二者基因表达差 异，发现双单倍体小黑杨中光合作用、植物激素合成以及韧皮部和木质部发育相关基因 显著下调表达。 关键词 小黑杨；双单倍体；么川基因；数字基因表达谱；XVE 万方数据 Abstract Abstract simonii oneofthe industrialandeconomic Popular(PopulusxPopular nigra)is important tree amodel forforestresearch．Itisfoundthatthe of species，is plant juvenileperiodpopular is traits when longer,whereasmany only expressadult．Therefore，stimulate precocious andshorten becomethe ofresearch．In flowering breedingperiod hotspot recent years， successfulof