抗鸭胸腺细胞单隆抗体的制备及其免疫组织化学研究.pdfVIP

摘要 本实验以成年鸭胸腺细胞为免疫抗原，免疫BALB／c小鼠，分离脾细胞，并与SP2／0 骨髓瘤细胞融合，获得了5株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞(B6、B8、C12、 E6、H5)。经鉴定可在体外长期培养，并能持续、稳定的分泌抗体。 通过免疫组织化学方法．以5株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体为第一抗体，以HRP 标记的羊抗鼠Ig抗体作为第二抗体，DAB．H202做底物，示踪单克隆抗体阳性细胞在鸭 免疫器官(胸腺、法氏囊和脾脏)不同发育时期的发生与分布，实验结果表明B8、c12、 E6、H5四株杂交瘤细胞分泌的抗体在组织中反应的阳性细胞是一致的。在8周龄鸭胸 腺的髓质中大部分的淋巴细胞染色，皮质中致密排列的小淋巴细胞不染色。1日龄、1 周龄、16周龄鸭胸腺中情况基本一致。在24周龄鸭胸腺的髓质中只有少部分淋巴细胞 染色。法氏囊滤泡的皮质和髓质以及粘膜上皮与淋巴小结相连的部位均有阳性细胞分布． 细胞形态不同，有少量淋巴细胞(主要分布于皮质和膜上皮与淋巴小结相连的部位)和 胞浆中具有分泌性物质，形态不规则的淋巴样细胞(主要分布于髓质中)呈阳性，分布 情况在不同日龄鸭的法氏囊中变化不大。在鸭脾脏的生发中心只有极个别的淋巴细胞和 树突状细胞染色，大部分的淋巴细胞不染色，生发中心外周淋巴