氯霉素全抗原合的研究及间接elisa检测方法的建立.pdfVIP

摘要 氯霉素是第 个人I．合成的广谱抗牛素，冈其效高价廉，住我国畜牧业巾得到』。。泛 应用，对畜禽疾病的控制和治疗起钊了重要的作用。随着氯镖素的广泛应Hj及研究的深 入，发现其有许多毒、剐作用，冈此，必须拧制氯霉系存动物性食品中的残留，保障消 费者健康与安全。 本文分两部分，第～部分将氯搿索(cA 卵清门蛋白(ovA)利用优化的晕氮化法、混合酸酐法、碳化二亚胺法进行偶联及鉴定， 分别作为免疫抗原及包被抗原，免疫抗原注射免疫新西兰大FI兔获得多抗血清。第_部 分建立了快速榆测氯霉素的nU接竞予ELIsA力法，并通过1爻验，对检测过程巾的各J_!；! 条件进行优化。 分别应』硝重氮化法、混合酸酐法、碳化_q雌法将cAP。J载体蛋ILIBsA偶联制备 人工合成抗原，以此作为免疫抗原，刚法合成包被抗原。它们的紫外H描光谱、sDs—PAGE 电泳、动物免疫试验均表明偶联成功。免疫2～3月龄新西!．犬门兔，获得多抗cAP抗 血清，硝闻接l乍竞争ELIsA法测定抗jm清效价。数据显示，混合酸酊法在合成氯霉紊 人J二抗原方山i较优于其他两种方法；．本试验用过碘酸钠改良法制备辣根过氰化物酶(HRP) 标址的午抗兔抗体，用辛酸 自接Ⅱ』sA测定也”J‘得出酶标抗体枷、记成功