cpg odn新城疫lasota活疫苗的免疫增强效应.pdf

摘要 细菌DNA富禽朱甲基化的CpG二核苷酸序列，能诱导脊椎动物产生强烈的免疫反虑。人 ODN)也能模拟细菌DNA获得同样的免疫刺激活性。本 工合成的CpG寡聚脱氧核苜酸(CpG 研究分析了人一【：台成的CpGODN和构建的CpG重组质粒对新城疫LaSola活疫苗的免疫增强 效应。 依据CpGODN的作用特性与构效关系，人T合成6条硫代磷酸化修饰的CpG序列，经体 子mRNA的表达(p‘O．05)。并且发现CpG 与摄取．上调NK细胞分泌IFN-7。 将CpG 后3周鸡血清中Hl抗体效价平均达8 21092、淋巴细胞刺激指数达9．836、巨噬细胞NO分泌量 达35．833 p_mol／L mRNA的水平，以及试验鸡的攻毒保 (p0．01)。此外，该组PBMC表达1FN-卜IL-6和IL-1p 活疫苗的特异性体液免接应答和Thl／Th2型细胞免疫应答。因此，CpG2006对新城疫活疫苗具 有良好的佐剂效应。 DNA单体的串联体，并 采用SOE—PCR方法和T．A克隆技术，获得含8和16拷贝数CpG 平均值达1．533，淋巴细胞增殖指数达8．026，巨噬细胞NO分泌量达18．376 pmol／L，显著高于 mRNA的表 对照质粒组(p0．01)。此外，pUC—CpG8组外周血淋巴细胞1FN．nIL．6和IL．113 达以及IFN．7／1L．6比值，均显著高丁对照组(p0．01)，且该组试验鸡的攻毒保护率达96．7％， 胞免疫应答能力。而pUC．CpGl6则表现为明显的免疫抑制作用(p0．05)。 综上结果表明，CpG2006对新城疫LaSota活疫苗免疫效果具有显著的增强效应，可作为疫 出佐剂进一步开发。研究结果为CpG在家禽疫苗中的麻片j及研制新型复合佐剂疫苗、DNA疫 苗提供了理论依据。 关键词：CpGODN，新城瘦LaSota活疫曲，免疫增强，鸡 Abstract dinucleotideswithin basesare abundantinbacterial UnmethylatedCpG specificflanking relatively DNAandareknownto stimulateinnate in vertebrates．These strongly immunity immunostimulatory activitiesofbacterialDNAcanalsobeachievedwith CpG syntheticCpG this of ODNsand (CpGODN)．Instudy,theimmunopoIen“ation efficiencysyntheticCpG recombinant various of onLaSotalivevaccine plasmidscontainingcopiesCpG2006 against Newcastle disease(ND)was invest