dna甲基化在胱癌诊断和乳腺癌5-fu化疗敏感性预期中的价值评估.pdf

籀要(息) 摘要(总) DNA甲基化是研究最为深入的非DNA排序依赖的表观遗传学机制，决 定着高等生物发育中细胞分化过程中基因转录的记忆。其异常可导致包括肿 瘤在内的疾病的发生。分析临床样品中肿瘤细胞的DNA甲基化谱式可望改 善肿瘤诊断和预后的临床实践。 本论文旨以通过1．对尿沉淀细胞DNA的 甲基化分析(膀胱癌的诊断)和2．对5．Fu敏感性有差异的乳腺癌细胞系进行 以证实DNA甲基化分析在肿瘤 DNA甲基化分析(乳腺癌化疗敏感性预期)， 临床实践中的价值。 复且大学医学院 上海市肿瘤研究所 硕士论文 前雷(总) 刖吾(思) 前雷(总) 表观遗传学是对非DNA排序机制所决定的细胞分化过程及其后果的基因表达 谱式的现象和机制研究的学科【l】。 表观遗传信息界面将基因型与表型、生命体和 环境相联系起来，其间的互作决定着基因转录模式的可遗传性，继而决定着细胞的 表型【2J。这一调控对高等真核生物的生命活动至关重要【3】，其异常会直接或间接的 影响基因组的完整性和细胞内基因表达的模式，从而导致包括癌症在内的众多重大 疾病【4J。对这一信息界面的诠释是当今生命科学研究的重大热点内容之一。 DNA甲基化(图1)是研究最为清楚的表观遗传学机制，涉及到由三种DNA甲 and删乃6)以S．腺苷甲硫氨酸作为甲基的供 基化转移酶(DNMTl，DNMT3a， 体，催化在CpG二核苷酸的胞嘧啶环上添加甲基的化学过程【51。有效、准确地将甲 基化谱式向下一代细胞传递是通过与DNA序列的半保守复制类似的方式来完成 的。 臆幢啶朐 腓啶☆』¨酸化 一SAH3M)卜晰 僻||HS啄k蛐亿 臆嘧啶 磷酸盐 I 水解脱氨基 O N_以 作用 尿嘧啶 硝酸盐 r 3。碱性脱硝 酸根作用 0陆 ? n¨¨”o 尿嘧睫 i 复且大学医学院 上海市肿瘤研究新 硕士论文 2 前言(总) 图1．胞嘧啶的甲基化 (A)DNA甲基转移酶1、3a或者3b，以S．腺营甲硫氨酸为甲基的供体，在胞嘧啶核苷酸嘧啶环的 第五个碳原子上催化合成一个甲基。 (B)C变为T，首先是胞嘧啶的磺化反应(1．胞嘧啶变为胞嘧啶磺酸盐)，紧接着发生水解脱 氨基作用(2．胞嘧啶磺酸盐变为尿嘧啶磺酸盐)，最后在碱性环境下脱去磺酸根(3．尿 嘧啶磺酸盐变为尿嘧啶)。甲基化的胞嘧啶能抵抗这些化学试剂的作用， 这样甲基化和 非甲基化的CpG能被随后的(包括甲基化特异的PCR)聚合酶链反应(PCR)检测。 肿瘤是涉及到DNA甲基化异常的重大疾病 癌症是遗传性疾病的命题【6】决定了过去半个世纪肿瘤领域研究主体是在DN