hsv-1感染神经胶质瘤细胞神经营养因子及相关受体表达影响的研究.pdfVIP

HSV-1感染对神经胶质瘤细胞神经营养因子及相关受体表达 影响的研究 摘要 目的： virus 1．研究单纯疱疹病毒1型(Herpessimplextypel，HSV—1)感染对神经胶质瘤 细胞凋亡的影响。 表达变化情况的影响，探讨HSV-1感染诱导神经细胞凋亡的机制。 方法： blot检测HSV—l糖蛋白D(gD)的表达情况；倒置显微镜下观察细胞形态学变化， 流式细胞仪检i贝tHSV-1感染对U251细胞凋亡的影响。 mRNA 的转录水平，Western 达水平。 结果： 后病变更加明显，绝大部分细胞变成圆形、椭圆形，胞体及胞核增大，细胞脱落， 胞质混浊，细胞透光性降低；24h可见所有感染细胞均出现细胞病变效应(CPE)。 2．RT—PCR、Western 12h开始出现少量细胞凋亡，随感染时间延长，凋亡细胞增多，至第30h近半数细 胞凋亡。在感染后24h、30h时，凋亡率分别为23．1％、25．1％与正常细胞凋亡率11％ 比较，差别具有统计学意义(R0．05)。 3．HSV-1感染U251细胞后，RT—PCR结果显示NGF和BDNFmRNA在各个时间点均有表达， 其中第6h表达量最高，随时间延长表达逐渐下降；P75町mRNA在各个时间点也均 mRNA在感染的开始阶段低表 表达，其在第12h达到最高，以后逐渐降低；而trkA 达，随时间延长逐渐降低，至24h表达消失。Westernblot结果显示在不同时间 高，以后逐渐降低。 ㈣Y2㈣0㈣4㈣4㈣04㈣6 结论： 1．HSv_1可在U251细胞内建立感染。 2．HSV-I感染可诱导U251细胞发生凋亡。 低亲和力受体P75m出现表达强度随时间先增强后减弱的趋势，而高亲和力受体 trkA持续低表达，BDNF表达强度与NGF呈现一致的随时间先增强后减弱的趋势。 推测神经营养因子及受体的异常表达可能参与了HSV-I感染致细胞凋亡的机制。 硕士研究生： 侯云(病原生物学专业) 导 师： 王斌教授 关键词：单纯疱疹病毒1型；神经胶质瘤细胞；神经营养因子；神经营 养因子受体 课题来源：国家自然科学基金支持81070501)； 山东省“病原生物学”泰山学者工程资助项目 TheeffectofHSV-1infectionOil of factorsand expressionneurotrophic related inHuman receptors GliomaCells Abstract Objeetive： 1．To the of in cellscausedHSV一1infection． studychangesapoptosisglioma by 2．To thetheeffectofHSV-1infectionon of factorsand study expressionneurotrophic in to its in order themechanismof cells，and