bfgf促进人皮细胞αv整合素及mmp-1表达的研究.pdfVIP

中文摘要 前 言 创伤是广泛危害人类豹“发达社会疾病”，深入研究刨伤后的组织修 复问题仍然是医学领域的重点和难点。创伤修复是体内多种因子和细胞参 与的复杂过程。外源性生长因子对刨伤修复的作用已成为当今创伤修复学 研究的热点。成纤维细胞生长因子(FCF)，尤其是碱性成纤维细胞生长 因子(bFGF)具有广泛的生物学活性，是伤口愈合过程中所有相关细胞 的促有丝分裂原、化学趋化及调节蛋白，可影响刨伤修复的整个过程。 bFGF调控刨伤愈合的机箭精细而复杂，深入了解其促创伤修复机制，对 指导临床合理有效的应用bFC,F具有重要意义，然而这方面的研究目前报 用的影响，来阐述bF晒促进内皮细胞(EC)迁移，加速血管新生、创 伤愈合的可能机制。 方 法 首先采用我室改进的Jaffe氏法进行HUVEC培养，待细胞达亚融合状 态后，换无血清培养液24小时，之后施加实验因素。HUVECOtv整合素 实验因素作用72h后，采用免疫细胞化学法及流式细胞仪检测法分析叫 m1)，采用Western免疫印迹法分析MMP—l蛋白的分泌情况。 结 果 免疫细胞化学检测结果：鲫整合素表达于内皮细胞(Ec)膜，呈棕 ·1· 褐色染色，bFGF明显促进0【v整合素的表达；TNP一470明显降低其表达； 式细胞仪检测结果与免疫细胞化学检测结果一致。Western免疫印迹检测 结果：bFGF组与对照组相比，MMP一1蛋白分泌量增多，差异有显著意 (P0．05)。 讨 论 bFGF可显著增强内皮细胞黏附迁移、分裂增殖及肉芽组织的形成， 促进伤口的愈合，已被许多实验所证实。然而bFGF这些生物学效应的具 体机理尚不清楚，因此本实验通过检测经bFGF刺激的HUVECOtv整合素 的表达及MMP～1蛋白的分泌情况，来阐述bFGF作用的可能机制。 Ⅸv整合素是细胞表面的跨膜糖蛋白，是细胞与细胞外基质(ECM) 之间相互作用和信息传递的桥梁，使EC与ECM连接，并引导EC在ECM 中游走迁移。本实验的免疫细胞化学及流式细胞仪检测结果显示，外源性 加入bFGF显著增强ECOtV整合素的表达，因此推测bFGF促进内皮细胞 迁移的机制之一，可能是通过上调仪v整合素的表达，从而加速EC的黏 附识别和迁移，进两促进血管生成，加速创伤修复。 TNP一470为特异性血管生成抑制剂，可抑制EC的生长和迁移，本 实验表明，TNP一470单独作用使HUVECOtv整合素表达降低，而bFGF 可减轻此抑制作用。 MMP一1为间质胶原酶，与组织创伤修复的血管新生过程密切相关。 可与I型胶原特异性结合并降解I型胶原，(I型胶原是闻质中的主要成 分)，同时降解Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、X型胶原，削弱ECM屏障作用，有利于EC 的游走迁移。从本实验的western免疫印迹分析结果显示，bFGF可以增加 内皮细胞MMP一1蛋白的分泌。因此推测bFGF促进内皮细胞迁移是与其 增加内皮细胞鲫整合素的表达及MMP—l蛋白的分泌密切相关的。 结论 1．bFGF可使体外培养的ECav整合素表达增强。 ·2· 2．bFGF可使体外培养的ECMMP一1蛋白分泌量增加。 3．TNP-470使EC 13／．V整合素表达降低；bFGF可逆转其抑制效应。 关键词：创伤修复；碱性成纤维细胞生长因子；内皮细胞；仪v整合 素；MMP一1 ·3· and onhumanendothelialcell MMP一1 Study of’，inteoin stimulatedbasicfibr