bim、p-at蛋白在乳腺癌癌变中的表达及意义.pdf

·中文论著摘要· Bim、p-Akt蛋白在乳腺癌癌变中的表达及意义 ．▲上-!圣 刖 吾 mediatorofcell Bim(Bcl-2interacting death)是Bcl-2家族中仅含有一个BH3 结构域的蛋白，具有助凋亡活性，广泛分布在机体各种组织，对防御自身免疫、 维持造血细胞稳态有重要意义，并具有肿瘤抑制因子活性。不同的细胞Bim表达 和功能的调节方式各异，包括转录水平、亚细胞定位、磷酸化调节等。Bim转录 水平调控十分复杂，可受到多种信号途径的调节，已报道的有MLK／JNK，P13K／AKT 发展关系密切。 本教研组的前期工作发现，P13K．Akt．Bad通路在乳腺癌的发生发展过程中有 是否扮演着同样重要的角色，这对指导乳腺癌的临床诊断和治疗有重要意义。 材料和方法 1、材料 织取自于中国医科大学附属第～医院2001年1月至2007年5月手术切除标本。 2、主要试剂 特异性抑制剂LY294002均购自Cell Blotting用二抗、兔 Signaling公司。Western 连TaKaRa公司，引物序列合成由TaKaRa公司完成。 3、方法 (1)免疫荧光方法检测Bim在正常乳腺上皮细胞系MCF．10A及人乳腺癌细胞 MCF一7、MDA．MB．23 1／3乏MDA．MB一435S中的表达。 (2)免疫组织化学(S—P)法检测Bim蛋白在乳腺各组病变组织中的表达。 皮细胞系及三种乳腺癌细胞系中的表达。 (4)Western (5)Western 中Bim和P．AKT蛋白表达的变化。 (6)采用SPSSl3．0统计学软件对Western 检验和Pearson相关性检验，确定pO．05有统计学意义。 结 果 1、免疫荧光方法结果显示Bim是一种浆表达蛋白。在正常乳腺上皮细胞 性表达。 mRNA的表达均高于 2、正常乳腺上皮细胞系MCF．10A中Bim蛋白及Bim P=0．009。 3、Bim蛋白在乳腺导管内增生性病变及浸润性导管癌组织中阳性表达率逐 渐降低，在乳腺普通导管增生与乳腺导管重度不典型及原位癌组间、重度不典型 及原位癌和浸润性导管癌组间阳性表达率差异均具有统计学意义(p=O．026； p=0．014)。Bim蛋白表达与患者的临床分期、淋巴结转移无明显关系，但与组织 学分级有关p=D．∞3)，且组织学分级越低，Bim蛋白阳性表达率越低。 4、 Bim和P．Akt在30例乳腺癌组织和癌旁正常组织中均有不同程度的表 达。其中Bim蛋白在癌组织中的表达明显低于对应的正常乳腺组织，平均灰度值 2 于对应正常乳腺组织，平均灰度值分别是0．710-J：0．219和0．412士0．115 (p=o．002)。两种蛋白在乳腺癌组织中表达呈负相关性(，=一0．489p=0．039)。 Western 达水平升高(pn酊)。 结论 l、正常乳腺上皮细胞系Bim蛋白及BimmRNA的表达均高于乳腺癌细胞系。 2、Bim蛋白的表达在乳腺癌癌变过程中呈递减趋势。Bim蛋白的表达与乳 腺癌组织学分级有关，组织学分化程度越低，蛋白阳性表达率越低。 3、Bim在癌旁正常组织中的表达均高于癌组织，P．Akt在癌旁正常组织中的 表达均低于癌组织。且这两种蛋白在乳腺癌组织中的表达量呈负相关性。 LY294002后，Bim蛋白表达水平逐渐升高，提 4、加入p-Akt活性抑SU：齐U 示在乳腺癌细胞中，Bim蛋白表达可能通过P13K／AKT信号通路来调控。 关键词 乳腺癌；