两株益生菌在凡滨对虾生物絮团养殖中的应用.pdf

II 万方数据 III 万方数据 两株益生菌在凡纳滨对虾生物絮团养殖中的应用 摘要 益生菌在提高养殖对虾产量、调控水质、提高对虾免疫力等方面的功能已得 到普遍公认。生物絮团是近几年来得到世界范围内认可的生态养殖模式，该养殖 方式不仅可以有效降低养殖水体中的有害无机氮净化水质，还可以为养殖对虾提 供营养物质，提高对虾非特异性免疫能力及抗病性。本实验从对虾养殖池中分离 鉴定，并通过筛选获得一株具有高效脱氮能力的细菌，并将其添加进养殖水体通 过添加碳源调节C/N 形成生物絮团。主要研究结果如下： 1、一株异养硝化反硝化细菌的筛选鉴定及其特性的研究。 采用富集培养和分离纯化等方式，从对虾养殖池中筛选出一株具有硝化反硝 化能力的细菌。通过形态观察、16S rRNA 测序分析该菌株与Bacillus megaterium 相似度高达99% 。将该菌株为巨大芽孢杆菌命名为201205311-D-3 。通过该菌株 在不同温度、pH 和盐度下生长得出该菌株的最适生长温度为30℃，最佳生长盐 度为25 ，最适pH 为8.0。通过该菌株在不同氮源培养基中生长及其对各种无机 氮的去除效果发现，该菌株最以按氨氮为唯一氮源的培养基中生长最好。在分别 以氨氮、亚硝氮和硝氮为唯一氮源的培养基中对各种无机氮的去除率分别为 （91.33±0.41 ）% 、（87.53±0.68 ）% 、（79.79±0.34 ）% 。在三种氮源同时存在的 培养基中，该菌株最先利用氨氮。该实验结果表明菌株201205311-D-3 具有高效 硝化反硝化能力，并适宜应用在对虾养殖水环境中。 2、两株单一菌株对凡纳滨对虾幼虾存活率及抗WSSV 的影响 将巨大芽孢杆菌 201205311-D-3 和美丽盐单胞菌 201107270102 添加进养殖 6 水体中使水体中细菌的浓度达1×10 cfu/mL，将两种菌包裹于饲料中投喂凡纳滨 对虾幼虾。以这两种方式处理投喂20 天后，统计幼虾成活率，并投喂WSSV 病 料进行攻毒感染，14 天后统计幼虾死亡率。实验结果表明：两种处理对虾幼虾 存活率均高于对照组，添加美丽盐单胞菌201107270102 组对虾幼虾对虾成活率 最高（74.17±1.18 ）% 。各处理组对对虾幼虾均有抗WSSV 作用，添加巨大芽孢 杆菌201205311-D-3 组对WSSV 相对保护率最高56.67%，显著高于其他各组和 对照组（P0.05 ）。添加巨大芽孢杆菌和美丽盐单胞菌以及将两种菌包裹进饲料 投喂均可显著提高对虾幼虾抗WSSV 感染能力。 3、两株特定功能益生菌在凡纳滨对虾生物絮团养殖中的应用 IV 万方数据 为研究两种菌在凡纳滨对虾生物絮团养殖中的作用，将巨大芽孢杆菌和美丽 盐单胞菌以及两种菌等量混合加入到凡纳滨对虾养殖水体中，并添加赤砂糖作为 有机碳源，培养生物絮团，并换水正常养殖和不换水正常养殖作为对照处理。结 果表明，添加碳源和细菌的生物絮团养殖组生物絮团生成量显著高于对照组 （P0.05 ），其中混合菌株添加的效果更佳。添加有机碳源和细菌的生物絮团养 殖组能够降低养殖水体中的氨氮和亚硝氮含量，提高凡纳滨对虾成活率，促进对 虾的生长。 关键词：硝化反硝化 凡纳滨对虾 生物絮团 益生菌