大鼠外周血淋巴胞生物钟基因的昼夜表达及钟控基因的筛选鉴定.pdfVIP

大鼠外周血淋巴细胞生物钟基因的昼夜表达及钟控基凼的筛选鉴定 中文摘要 中文摘要 自然界从低级到高级的大多数生物，其生理和行为的功能多呈现F1伎交督的节 律，即昼夜节律。在,flJ孚L动物中控制这些昼夜生理节律的生物钟位于下丘脑视交叉 上核(SCN)，其分子水平的机制是由一些钟基因及其蛋白产物组成的转录一翻译负反 生物钟不仅存在于中枢神经系统，也可能存在于外周组织如肝脏、肾脏和成纤维细 胞。但迄今为止，对免疫系统昼夜节律机制的研究很少，更没有免疫系统生物钟的 研究报道。 目的：建立免疫系统生物钟的细胞模型：探寻Clock的钟控基因，为免疫系统 昼夜节律调控机制的研究提供基础性资料，同时也为免疫性疾病的防治提供新的思 路。 方法：用半定量逆转录PCR进行钟基因Clock和相关基因褪黑素受体基因mtl 和mr2昼夜表达水平检测；用基因差异表达显示技术寻找昼夜差异表达的基因，并 在此基础上，用RANi技术和实时定量PCR技术鉴定昼夜差异表达的基因是否为处 于Clock下游的钟控基因。 表达，光照能引起昼夜节律参数的改变。(2)在外周血淋巴细胞中，初筛出31个有 明显昼夜表达差异的条带．经鉴定确定了10个差异表达eDNA