家蚕蚕蛹过敏原白质组学和分子生物学研究.pdfVIP

摘要 捅 要 mori 家蚕(BombyxLinaeus)是我国的重要经济昆虫，与此同时，家蚕又 是一种重要的昆虫致敏原。家蚕蚕蛹在传统中医中作为一种药物被用来治疗高 血压和脂肪肝，中国人有食蚕蛹的习惯，有关食用蚕蛹引发过敏的病例也时有 报道，因此在中国，蚕蛹是一种重要的食物过敏原。本文旨在对家蚕蚕蛹的过 敏原进行研究。 1．家蚕蚕蛹过敏原的SDS和免疫印迹分析：首先利用超速离心法提 取家蚕蚕蛹的总蛋白，用12％的SDS—PAGE对蛋白粗提液进行分离，之后分别用 11份家蚕蚕蛹过敏病人的血清与蛋白进行IgE结合测试。结果发现：家蚕蚕蛹 的蛋白有10多条蛋白质条带，其中在25kDa附近3条为主带。在与11份患者 提示家蚕蚕蛹中确实存在着特定的过敏原蛋白。 2．家蚕蚕蛹过敏原的蛋白质组学研究：本部分实验目的是通过双向电泳、， 免疫印迹、质谱的方法对家蚕蚕蛹过敏原有更明确的研究。首先用双向电泳对 家蚕蚕蛹蛋白进行分离，构建较为完整的家蚕蚕蛹蛋白双向电泳图谱：接着利 用免疫印迹方法，使电转印到膜上的蛋白与阳性家蚕蚕蛹过敏患者混合血清进 行反应，对于能够与过敏病人血清中IgE结