大鼠机械性脑损动态变化的蛋白质组学研究.pdf

中文摘要 大鼠机械性脑损伤动态变化的蛋白质组学研究 摘 要 目的：建立体外培养神经细胞和大鼠创伤性脑损伤动物 模型，研究损伤后培养神经细胞形态学改变和大鼠海马蛋白 质组表达情况，寻找差异性生物标志蛋白。 方法：选新生24小时内SD大鼠，取海马组织，培养 细胞形态学观察。选成年雄性SD大鼠随机分为手术对照组 及损伤后4h、8h、1 体打击大鼠脑损伤模型，采用双向凝胶电泳技术分析大鼠闭 合性脑损伤后不同时间海马中蛋白质组表达的改变。 结果：1体外培养神经细胞液压冲击损伤装置稳定性评 价：通过记录小室内和有机玻璃管内的压力大小来检测液压 冲击损伤压力的大小，结果表明，小室内和有机管内的压力 压力，X代表小室内压力)，造成细胞损伤力的大小以小室 内的压力为准。有机玻璃管和小室内压力随钟摆打击角度的 液压冲击损伤所需钟摆下落角度分别为13．50、21．50和27。。 2液压冲击损伤神经细胞形态学改变：液压冲击后，神经细 胞甲苯胺蓝染色，正常神经细胞胞核呈蓝色，胞浆染成淡蓝 色，损伤组培养神经细胞主要表现为部分神经细胞胞体浓 缩，胞核固缩，染色较深，呈深蓝色，多为坏死型损伤细胞， 中文摘要 甲苯胺蓝染色，坏死型损伤细胞较正常细胞深染，各损伤组 神经细胞可见不同程度损伤，损伤后8h达高峰，随后逐渐恢 复接近正常。 0胶条上，损伤后共有 3蛋白质双向电泳结果：(1)在pH3．1 65个蛋白质点的相对强度与手术对照组相比有显著性差异 (尸O．05)，有32个蛋白质点在损伤组未检测到，7个蛋白 质点仅在损伤组检测到(2)在pH4．7胶条上，损伤后共有 44个蛋白质点的相对强度与手术对照组相比有显著性差异 7个蛋白 (尸O．05)，有6个蛋白质点在损伤组未检测到，1 O胶条上，与手术对照 质点仅在损伤组检测到(3)在pH3．1 组比较，损伤组中有9个蛋白质点在两个或以上时间点未检 测到；1个蛋白质点在损伤后8h、12h未检测到；2个蛋白 质点在损伤后8h、48h未检测到；1个蛋白质点在损伤后24h、 2h、48h未检测到；1 48h未检测到；4个蛋白质点在8h、1 个蛋白质点在4h、8h、12h、24h、48h未检测到；2个蛋白 质点仅在8h未检测到；1个蛋白质点仅在12h未检测到；4 个蛋白质点仅在48h未检测到。与手术对照组比较，损伤组 中有1个蛋白质点在两个或以上时间点可以检测到；1个蛋 白质点在损伤后8h、12h、24h、48h可以检测到；1个蛋白 质点仅在损伤后8h可以检测到；2个蛋白质点仅在损伤后 12h可以检测到。(4)在pH4．7胶条上，与手术对照组比较， 损伤组中有1个蛋白质点在两个或以上时间点未检测到；1 个蛋白质点在损伤后4h、12h、24h、48h未检测到；1个蛋 白质点仅在损伤后8h未检测到；1个蛋白质点仅在损伤后 48h未检测到。与手术对照组比较，损伤组中有3个蛋白质 点在两个或以上时间点可以检测到；1个蛋白质点在损伤后 中文摘要 2h、24h、48h 24h、48h可以检测到；2个蛋白质点在损伤后1 可以检测到；1个蛋白质点仅在损伤后4h可以检测到；3个 蛋白质点仅在损伤后8h可以检测到；4个蛋白质点仅在损伤 后12h可以检测到；1个蛋白质点仅在损伤后48h可以检测 O胶条上，与手术对照组比较，损伤后共 到。(5)在pH3．1 有34个蛋白质点表达增高；有31个蛋白质点表达降低．j其 中损伤组中有6个蛋白质点在两个或以上时间点表达增高； 1个蛋白质点在损伤后8h、12h表达增高；1个蛋白质点在