乌贼墨诱生小鼠fn-γ及调节lak细胞活性的研究.pdfVIP

中文摘要 前 言 分九十年代初，由于日本青森产业技术中心和弘前大学专家 小组发现乌贼墨汁中含有高效抗肿瘤活性的物质而倍受关注。许 多学者相继对其活性物质结构，抗肿瘤作用和免疫调节功能做了 深人研究。 研究表明，乌贼墨及其提取物没有表现出对肿瘤细胞直接的 细胞毒活性，提示其是通过刺激机体免疫系统，间接发挥抗肿瘤作 用。因此，乌贼墨及其提取物抗肿瘤活性的作用机制成为众多学 者关注的问题。目前，国内的研究主要集中在乌贼墨及其提取物 的免疫调节功能方面。研究结果证实，乌贼墨能够刺激和增强巨 噬细胞活性。乌贼墨的抗体产生促进作用提示其可能是作为一种 免疫佐剂，对机体的特异性免疫功能，特别是体液免疫功能起助长 作用。进一步研究发现，乌贼墨在小鼠体内具有使TNF,IL一1,IL -2等细胞因子产生水平增高的活性。同时，也使NK细胞活性 增强。 在已经证明乌贼墨及其提取物能够诱生上述细胞因子和免疫 活性细胞，调节免疫功能的同时，也不能排除其在诱导过程中还产 盯靴姗附溅舫腼秘牌撇群肋碳公 一 为这一系统研究课题的一部分，在以往研究结果的基础 墨对小鼠血清中干扰素一袱IFN一们的产生水平和淋 巴因子激活的杀伤细胞(LAK)体外杀伤活性的影响进行了动态 检侧，通过深人研究乌贼墨在表达抗肿瘤活性过程中其他细胞因 子以及免疫活性细胞所发挥的作用，以期有助于较全面的阐明乌 孩墨增强机体免疫功能的综合性效应，有利于对其进行充分的开 发和综合利用。 ·1· 一一~，，户，种，种种..， 一 一 ____ / 了 材料与方法 味 6 0 只小鼠，分6组，每组10只，其中5组为实验组，另一组 为对照组。实验组小鼠每天灌胃5%浓度乌贼墨0.5ml，每天一 次，连续5天。对照组小鼠用同样方式给予等量生理盐水。分别 于灌胃后第24,48,72,96,120h采血，分离血清。用ELISA法定量 侧定5个不同时段和对照组小鼠血清中的IFN一，产生水平。并 且，用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测IL一2诱导的LAK细胞体外 杀伤肿瘤细胞活性。 实验结果 1.乌贼墨对小鼠血清中IFN一，产生的影响 应用ELISA法检测经乌贼墨处理的小鼠血清中EM一Y水平 变化IFN一y的产生于末次乌贼墨灌胃后第24h(212.04t58. 55pg/ml)后开始升高，48h达到高峰(422.17t40.23pg/ml),72h (220.73土52.66pg/ml)则降至正常水平，对照组小鼠血清中IFN 一7水平为225.7t50.45pg/mlo48h组小鼠血清中IFN一，水平 和对照组小鼠比较显著增高(P0.01), 2.乌贼墨对小鼠LAK细胞体外杀伤活性的影响 经乌贼墨处理后的第48h组小鼠的LAK细胞对靶细胞的体 外杀伤率为(28.8士6.4)%，对照组小鼠的LAK细胞对靶细胞的 体外杀伤率为(10.7土2.3)%，取两组的体外杀伤率做t检验，差 异显著(P0.01)。 讨 论 在利用免疫应答原理和免疫学方法杀伤肿瘤的研究中，已经 逐步发现了众多免疫治疗因子。通过其作用于宿主免疫系统，诱 发或增强抗肿瘤免疫应答，以达到消灭肿瘤或延缓肿瘤生长的目 ·2 · 的。这些治疗因子可以是肿瘤特异性的，也可以是非特异性的。 随着在海洋生物中不断发现并提取到重要的可用于肿瘤免疫治疗 的治疗因子，乌贼墨由于已被证实含有高效抗肿瘤活性物质而逐 渐受到关注。 在以往研究基础上，我们在本次研究中又进一步观察了经口 服乌贼墨刺激后，对小鼠血清中干扰素一袱IFN一，)的产生水平 和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)体外杀伤活性的影响。结果 表明，经乌贼墨处理的小鼠血清中IFN一y水平显著提高。小鼠 血清中IFN-y水平的提高在一定程度上支持了以往有关乌贼墨 及其提取