人重组白介素2感染弓形虫孕鼠t细胞亚群、nk细胞及胚胎的作用.pdfVIP

人重组白介素2对感染弓形虫孕鼠T细胞亚群、 NK细胞及胚胎的作用 研究生：单联吉占 导师：殷国荣侯玉英 摘要 目的：用不同剂量的rhulL一2给弓形虫感染的孕鼠腹腔注射，研究 感染弓形虫后孕鼠的T细胞亚群、NK细胞的动态变化以及rhuIL一2对孕 鼠外周免疫及胚胎的作用。 ／方法：将80只妊娠第0天的BALB／c孕鼠随机分为4组：空白对照 组，、实验对照组及两个rhulL一2处理组，每组20只。实验对照组与两个 rhuIL一2处理组于妊娠第8天腹腔感染RH株弓形虫速殖子400个／只， 空白对照组腹腔注射0．2ml生理盐水；两个rhulL一2处理组分别于感染 实验对照组与空白对照组注射0．2ml生理盐水。于妊娠第10、12、14和 16天分别将孕鼠颈椎脱臼处死，每组5只，解剖孕鼠的子宫，观察胚胎 发育情况，记录各组孕鼠活胎、死胎、吸收胎、畸胎的数目，计算平均 活胎率并比较各组的差异：取妊娠第12天处死的孕鼠的胎盘、胚胎，用 4％的甲醛固定，做弓形虫抗原的免疫组化染色，观察胎盘和胚胎弓形虫 感染情况，以胚胎感染计算弓形虫的垂直传播率，比较各组的差异。取 不同妊娠期处死孕鼠的脾制成淋巴细胞悬液，用流式细胞仪检测各组孕 鼠T细胞亚群及NK细胞水平的变化。 结果与讨论：免疫组化结果表明：妊娠第12天已发生弓形虫的垂直 传播，胎盘感染弓形虫后，胎盘的滋养层细胞、绒毛间隙均有大量的弓 形虫抗原的表达；在孕鼠子宫的腺体和蜕膜细胞胞浆内也有弓形虫抗原 的表达。部分孕鼠的胎盘有弓形虫抗原的表达，而胚胎组织却无弓形虫 抗原的表达。弓形虫感染胚胎时，弓形虫抗原主要出现在组织分化区。 与空白对照组相比，感染孕鼠脾CD4+T细胞在各个时期的水平都较 低(PO．05)，妊娠第16天后，有轻微的回升：脾CD8+T细胞水平在各 个时期呈持续升高的状态，明显高于空白对照组(P(O．05)。Ct)4+／c08+ T细胞比例在妊娠第12、14天都倒置，而妊娠第16天有轻微的回升， 但仍低于空白对照组(PO．05)。说明感染弓形虫后，孕鼠T细胞亚群比 例失调。感染孕鼠脾NK细胞明显减少，在妊娠各时期的NK细胞都较低， 平升高导致二者Ltff『J失调，脾NK细胞水平降低可能是导致弓形虫垂直传 播的重要因素。 低剂量rhulL一2处理组与实验对照组比较，平均活胎率无明显差异， 而高剂量处理组明显升高，差异显著(P(O．05)。两处理组与实验对照组 比较，垂直传播率均明显下降，差异显著(P(O．05)。结果显示，一定剂 量的rhulL一2可以使活胎数明显增加、弓形虫的垂直传播率降低，对胚 胎起到一定的保护作用。 较实验对照组明显升高，可达与空白对照组相近的水平。低剂量组的CD4 +T细胞水平与实验对照组相比无明显差异。两rhulL一2处理组的脾CD8 +水平与实验对照组相比，呈明显下降的趋势(PO．05)。总体上看，低 异，而高剂量组的T细胞亚群比值有所上升，可达空白对照组水平。高 剂量rhulL一2组脾眦细胞数量明显上升，与实验对R导组相比有明显差异 (PO．05)，提示rhulL一2可促进NK细胞的增殖。y 结论：成功建立了弓形虫垂直传播动物模型。感染弓形虫孕鼠在妊 娠期脾T细胞亚群比例倒置，NK细胞数量明显下降，提示细胞免疫受抑 是弓形虫垂直传播的重要因素。RhuIL一2应用于感染弓形虫孕鼠，起到 一定保护胎鼠的作用，使活胎数目明显增加，并阻止弓形虫的垂直传播。 低，从而使二者比例回升，同时也起到促进NK细胞增殖的作用，提高了 孕鼠的外周细胞免疫水平，对孕鼠和胚胎起到一定的保护作用。弓形虫 抗原在胎盘出现的部位提示，胎盘作为局部免疫屏障具有重要的研究价 萎鑫词：小鼠；。。芝／日。地弓嘉盖；，细析。。细诡{免疫著毳 垂直传播； 妊娠 √ √ and of onTcellsubset，NKcells RhulL-2 Effect embroys mice o