伊维菌素的抗体备及elisa法残留分析.pdf

摘要 辞牧业。然而作为高毒性化合物和在动物体内的长效特性，lVM在动物组织中的残留_；i=f；容忽视。 本研究旨在制备和筛选针对IvM的多克窿抗体，井以此抗体为捩心试剂建立梭测动物组纵中IVM 残辫的ELisA快速检测方法。 本辑究将伊缎藩素flvefmectblv黼)翻备成；≯挠簌4叫攀卜琥琏酸{V划秘5-。_零)貔珀 酰IvM，质谱鉴定其分子鼙为976和976．3，与目标产物分子缀一致。将半抗原4’．_州单埔珀 为疑娃结果。免疫抗原与包被抗羰经sDs—PAG嚣邀澈鉴定，载馋蛋矗与二#抗簌的缀合比l：14，s～ l：30．2。 作为免疫抗原免瘦新西兰白兔，经过5次免疫后，三抗血清的效价可达l：105。通过非竞争抑制 试黢对盘渍效价测定结莱致抗体缝纯嚣的wes拇mblot结暴，霹双著出强4”_￡H单卜瑗霸酰 骧王鑫醚{vM—PLL抗藩为基萋窭建嶷芝乙堪A竞争性瓣露l试验。避避方阵法确定趣羰撬擐、撬体粒袋 适j1：作浓度，绱聚裘明包被抗腻的包被浓度为30Hg，ml，两抗体的稀释倍数均为{；1旷，酶标= 明pH值(6．4～8．4)、离子强度(o．05～1．5M 鹁嚣己lSA竞争反癍均无羁显影嘲，瑟静撬傣建立麴琶LlsA竞争爱癍中穆骧p嚣氇7。4、枣子疆攫 0．50M(NaCL)和10％甲醇为萋础反应条忭。 研究中同时建立的三种抗体在选择同一个包被原和不同包被原时，共四个试验组合，米进行 lvM的ELIsA残留分析时的标准曲线，并比较了四组合在残国检测最低限剽灵敏性的不嗣。对 嚣个夔线分撬绻袋为所设诗的嚣个试验在强予lv黻豹残塑捡测对，均轻满足|v鞭强蟹捡溅癸求， 旗中检测限最低的为o83 的免疫增强载体时优于BsA。 研究中采岗躲ELlsA方法检测动物四种缎织(腿肉、肝脏、血浆和牛奶)中的|vM，没诗 戮个不露抗棒和毽被原缀台右案，遗行了两牧率的确定。瑟个蕊验中(第圈牵试验5)对魂秘维 织中添加IvM检测同收率在93．9％～l01．2之间，变异系数不超过5．1％，(第四章试验6)对动 继粜。 研究结桑袭嚼，竣抗4 JvM．PLL可以诱导动物产生优良的抗体．能成功鹰用丁lVM的ELIsA方法残留检测中。 lI Abstract ak{棚ofantiblotiesthat of lactone．1thas lⅥrmect-n(1VM)ls bolongs静也e蠡mnyma吣eyc珏e ＆en us舞瓤li增哟ok of瓤lling扛em。幻des黼da难l柏p酣s。辩owoV旗 w{dely d疆e幻蛞b∞舞s辨e拉疆m IVM aSa itsresidueinanimaltissueshouldnotbe is协ken po{sonouscompound，so ignored．The t0 to onme 0fthis is selectthe funherbased purposestudy acqu№and antjbodyIVM，and antibod弘 ofELISAtodetectIVMresidueinanimaltissue． devel0廿abe仕ermemod aIld were IVM．Mass Haptcns4’oO—succinyl·lVM5—O-succinyI-JVMprepairedbyus{ng testshowe珏th盛tkif was sp。c棵。黼et碍detec蛀on ∞nsi瓣nt扔