聚天冬酰胺衍生物的合成及细胞毒性研究.pdfVIP

582 TianjinMedJ。June2015，Vo1．43No．6 聚天冬酰胺衍生物的合成及细胞毒性研究 杨翠红 ，韩京华 ，刘金剑 ，张玉民 ，高红林 ，董文慧 ，王燕铭 摘要：目的 合成一种聚天冬酰胺衍生物并对其细胞水平的安全性进行评价 ，为其作为药物载体应用提供研究 基础。方法 通过 L一天冬氨酸热缩聚合成聚琥珀酰亚胺 ，利用苯丙氨酸甲酯盐酸盐和乙醇胺对聚琥珀酰亚胺进行 开环反应得到载体PSI—Phe—EA；利用 HNMR进行聚合物结构表征；采用内标法磁氢谱计算其开环率；通过水溶性 的比较验证其亲水性变化；采用MTF法对聚合物的细胞增殖抑制进行研究，利用倒置显微镜观察聚合物对细胞微观 形态的影响；利用碘化丙啶(PI)染色法通过流式细胞仪研究聚合物对细胞周期的影响。结果 HNMR确证了开环 衍生物PSI—Phe—EA的结构，PSI的开环率为40％；乙醇胺开环后聚合物的亲水性得到了明显改善；MTT实验表明， PSI—Phe—EA在所检测浓度范围内(100ms／L)，对NIH3T3和HepG2两种细胞的24h细胞存活率均在 80％以上；倒 置显微镜观察表明，50mg／L的PSI—Phe—EA孵育 24h后以上两种细胞的形态与对照组无明显差异；细胞周期分析 表明PSI—Phe～EA处理与否对细胞周期分布的影响无明显差异。结论 合成的聚天冬酰胺衍生物 PSI—Phe—EA亲 水性明显提高，且对细胞的存活、微观形态以及周期分布均无明显影响，是一种安全的高分子材料。 关键词：天冬酰胺；苯丙氨酸；乙醇胺 ；药物载体；细胞周期 ；聚天冬酰胺衍生物；细胞毒性 中图分类号：R916 文献标志码：A DOI：10．11958／j．issn．0253-9896．2015．06．002 Synthesisofpolyasparaginederivativesanditscytotoxicitystudy YANGCuihong，HANJinghua，LIUJinjian，ZHANGYumin，GAOHonglin，DONGWenhui，WANGYanming TianjinKeylaboratoryofRadiationMedicineandMolecularNuclearMedicine，InstituteofRadiationMedicine，Chinese Academy0厂MedicalScienceandPekingUnionMedicalCollege，Tianfin300192，China；2StateKeyLaboratoryofMedicinal ChemicalBiology,CollegeofPharmacy,NankaiUniversity Cor~spondingAuthor E—mail：wangyanming@nankai．edu．cn Abstract：Objective Tosynthesizepolyasparaginederivativesandtoevaluateitssafetyatthecellularlevel，which provideresearchplatform foritspotentialapplicationasdrugcarrier．M ethods Polysuccinimidewassynthesizedbyther· realpolymerizationofL—polyasparticacid．andthetargetproductofPSI—Phe—EAwasob~inedbythering—openingreaction ofpolysuccinimideusingL-phenylalaninemethylesterhydrochlorideandethanolamine．ThestructureofPSI—Phe—EA werecharacterizedbyHNMR．Therateofring-openingofPS1was