镰形扇头蜱半胱酸蛋白酶基因的克隆及免疫效果研究.pdf

捅要 蜱是家畜家禽的一类体表寄生虫，分布广泛，可传播由细菌、病毒、立克次体、 螺旋体和血液原虫等引起的多种疾病，不仅给畜牧业造成很大的经济损失，同时还影 响人类健康。我国目前发现的蜱种有100多种，其中，镰形扇头蜱是我国南方的优势 蜱种，主要传播牛巴贝斯虫病、马巴贝斯虫病和吉氏巴贝斯虫病。 目前对蜱的控制主要使用化学杀虫剂。然而，随着蜱抗药性以及畜产品的药物残 留等问题的出现，寻找新的抗蜱方法就显得尤为重要。相对于化学杀虫剂来说，免疫 预防被认为是一种最有前途的控制蜱的方法。据报道，半胱氨酸蛋白酶在寄生虫的发 育、营养等生命活动中有不可缺少的生物学功能，被认为是一类抗虫疫苗和药物研究 的重要分子：本研究以镰形扇头蜱为研究对象，通过从镰形扇头蜱体内克隆半胱氨酸 蛋白酶基因，并在体外表达，分析其功能，为蜱及蜱传疾病的防制作一些探索性工作。 首先，根据半胱氨酸蛋白酶的保守性氨基酸序列及镰形扇头蜱氨基酸密码子特性设 扩增，PCR产物经纯化、连接入pGEM．T质粒载体、转化大肠杆菌DH5o和测序。 TTG一3’，nested GAGAC．3’，nested PcR产物经纯化、连接、转化和测序。根据测序结果，设计基因特异性引物用于扩 ．AGGTcAcTT