阮蛋白核酸疫苗疫效果初步评价.pdfVIP

摘 要 摘 要 目的将带有泛素、溶酶体及内质网信号的PRNP真核表达载体作为DNA疫 苗免疫小鼠，以期打破机体对朊病毒的免疫耐受，获得较好的体液免疫和细胞免疫 反应，为朊病毒病的疫苗性免疫预防提供一定的数据和参考。 细胞后，使用WesternBlot检测蛋白表达特点。(2)采取DNA肌肉注射与重组蛋 白腹部皮下注射相结合的疫苗免疫方案，免疫结束后两周，采集小鼠血清、脾细 将4．6周的雌性BALB／e小鼠随机分为6组，7只／组：pcDNA3．1空质粒组， 组，以上各实验组均进行蛋白增强免疫；另一组为pcDNA3．1不进行蛋白增强的 对照组。无菌PBS稀释DNA疫苗至1心山，小鼠左右腓肠肌注射各509l／次，即 100 p∥次／只。DNA疫苗免疫三次后，实验组小鼠腹部皮下注射原核表达的重组 PrP加强免疫两次，每次100 lag。每两次免疫间隔两周，最后一次免疫后两周采 集小鼠血清、脾细胞，进行免疫学检测。 结果 (1)各组质粒转染HeLa细胞后，分别于36小时和48小时检测载体 的表达，实验结果显示各组疫苗质粒均能在HeLa细胞中