人教版生物选修一专题5《DNA和蛋白质技术》ppt课件1.pptVIP

(1)材料的选取：选用DNA含量相对 的生物组织，如非哺乳动物的红细胞（鸡血）、菜花、洋葱等。 （2）材料处理：鸡血（吸水胀破法），植物细胞（洗涤剂和食盐。食盐的作用是溶解DNA，洗涤剂的作用的溶解细胞膜） 提取血细胞核物质(蒸馏水涨破)→溶解(2 mol/L的NaCl溶液)→过滤(除杂质)→析出(滴蒸馏水，降NaCl溶液浓度至0.14 mol/L)→过滤→再溶解(2 mol/L的NaCl溶液)→过滤→进一步提纯(体积分数为95%的冷却酒精)→鉴定。 提纯环节中还可加入肉嫩粉（木瓜蛋白酶），将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温10～15分钟能去除滤液中的杂质 要点 1、三次过滤 2、两次沉淀析出 3、两次加蒸馏水 4.关于DNA粗提取与鉴定实验的有关说法正确的是 A充分溶解DNA的盐溶液是0.14mol/L的NaCl溶液 B实验中提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点 C对最后提取出DNA用二苯胺试剂鉴定时需用酒精灯直接加热 D实验操作过程中先后两次加入蒸馏水的作用相同 6.下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是 A．洗涤剂能瓦解细胞膜，同时也能控制DNA在NaCl溶液中的溶解度 B．在探究洗涤剂对植物细胞DNA提取的影响实验中，需要控制的变量是洗涤剂和植物细胞 C．常温下，DNA遇二苯胺被染成蓝色 D．将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温10～15分钟能去除滤液中的杂质，其原理是利用了DNA和蛋白质对高温耐受性的不同 7.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是 （ ） A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低而减小 B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA C．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于所有有机溶剂 D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应 PCR技术扩增DNA片段 1．原理：DNA复制。2．条件：模板、原料、酶。3．场所：体外PCR扩增仪。4. 过程：(1)变性:当温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋为单链，(2)复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 (3)延伸：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链， PCR技术的应用 PCR技术模拟细胞内DNA的复制过程，实现对某一段DNA的扩增。PCR技术能在几小时内将极微量的DNA特异性地扩增上百万倍，从而有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的难题，大大提高了对DNA分子的分析和检测能力，被广泛地应用于基因克隆、基因序列分析、遗传病诊断、古生物学研究以及刑侦破案、亲子鉴定等诸多方面。 * 专题5　DNA和蛋白质技术 考点一　DNA的粗提取与鉴定 1.基本原理 提取原理 　DNA在NaCl溶液中的溶解度随浓度的变化而改变，DNA在0.14mol／L的NaCl溶液中溶解度最低。 提纯原理（对酶、高温和洗涤剂的耐受性及在酒精中的溶解度不同） ①酶的专一性——蛋白酶水解蛋白质而对会对DNA不产生影响。（加柔嫩粉） ②蛋白质、DNA热稳定性不同。温度值为60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。 ③洗涤剂瓦解细胞膜，对DNA没有影响。 （3）DNA鉴定原理 在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色 获得含DNA的滤液 过滤溶解有DNA的2mol/L NaCl溶液 第二次 获得含核物质的滤液 过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 第一次 获得纱布上的粘稠物，其化学本质是DNA 过滤含黏稠物的0.14mol/L NaCl溶液 第三次 目的 过滤 DNA在冷却的95%的酒精中能沉淀析出 第二次 DNA在氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时溶解度最低 第一次 依据的原理 降低NaCl浓度使DNA析出 第二次 使血细胞破裂 第一次 加蒸馏水的目的 B D B 　PCR扩增技术和DNA复制的比较 细胞内DNA复制 PCR 不 同 点 解旋 解旋酶，边解旋边复制 80～高温解旋，双链完全分开 酶 解旋酶，DNA聚合酶，DNA连接酶 Taq DNA聚合酶 引物 RNA DNA或RNA 能量 ATP 不加 温度 体内温和条件 高温 细胞内DNA复制 PCR 不 同 点 子链合成 一条链连续(先导链)，另一条链不连续，先合成片段，再由DNA连接酶连接(滞后链) 两条子链均连续合成 相同点 ①提供DNA模板；②四种脱氧核苷酸做原料；③子链延伸的方向都是从5′端到3′端 考点二　血红蛋白的提取和分离 　　1.凝胶色谱法 　凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法之一。所用