西洋参皂苷对缺性大脑皮层神经元坏死及凋亡的影响.pdfVIP

摘要 摘 要 目的： 观察西洋参皂苷对缺氧．复氧诱导后胎鼠大脑皮层神经元坏死和凋亡的影 响，并探讨其作用机制。 方法： 1、离体培养胎鼠大脑皮层神经元6d，免疫细胞化学染色法检测NSE及GFAP 表达率； 2、MTT法检测不同浓度组西洋参皂苷对神经元活力的影响； 3、神经元离体有氧培养4d，经缺氧12h复氧48h培养建立缺氧．复氧损伤凋 亡模型； blue拒染法检测不同缺氧时间(6h，12h，24h)对神经元存活率影响； 4、Trypall 5、实验分组：正常对照组：正常有氧培养；阳性对照(凋亡诱导)组：正常 培养4d后行缺氧12h复氧48h培养；药物组：正常培养4d后分别加入终浓度 为O．025、0．05、0．1、O．2m∥ml西洋参皂苷预处理4h，余同阳性对照组； 6、MTT法检测各实验组神经元活力： 7、AIⅡ1exin V-FITC／PI双染法，流式细胞仪定量分析各实验组凋亡率及坏死 率； 8、免疫细胞化学染色法检测各实验组抗凋亡蛋白Bcl．2及凋亡蛋白Bax和 Caspase．3表达率； 9、DNA琼脂糖凝胶电泳法检测各实验组DNA梯度凋