角膜血管膜上皮胞表型鉴定及新生血管相关靶点的筛选.pdfVIP

摘要 目的：通过鉴定临床角膜血管膜标本的上皮细胞表型，检测新生血管相关因子的表 达情况，探讨Avastin等抗VEGF药物治疗角膜新生血管疗效差异悬殊的可能原因， 筛选角膜新生血管治疗相关的靶点因子，并通过小鼠角膜新生血管模型进行验证。 方法：本研究共收集26例新生血管性角膜病患者的角膜新生血管膜组织，包括一次 血管膜组织19例，其中化学伤8例、热烧伤7例、爆竹炸伤3例、眼瘢痕性类天疱 综合症1例。通过免疫组织化学方法，检测血管膜中上皮细胞的表型，并与角膜和 结膜上皮进行比较。应用基因表达芯片筛选血管膜中高表达的新生血管调控因子， 并通过实时定量PCR进行验证。最后，通过建立缝线、碱烧伤、贯通伤及接触镜诱 导的小鼠角膜新生血管模型，观察角膜新生血管的动态生长情况，检测VEGF等新生 血管关键调控因子的表达变化，对临床标本的结果进行验证。 结果：通过免疫组织化学染色对一次和二次血管膜组织的上皮细胞进行表型鉴定， 似。在24例临床血管膜标本中(化学伤13例、热烧伤8例、爆竹炸伤3例)，筛 选并验证出15个新生血管相关的关键调控因子，但均未检测到VEGF的高表达。通 过对缝线、碱烧伤、贯通伤及接触镜诱导的角膜新生血管小鼠模型的检测发现，四 种模型的小鼠角膜中VEGF的表达呈现相似的变化趋势，术