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ANXA2在视网膜新生血管形成过程中的表达及作用机制 摘 要 umbilicalvein 目的通过观察ANXA2在体外高糖培养的人脐静脉内皮细胞(Human endothelial 究ANXA2对HUVEC增殖，迁移，成管能力的影响，对小鼠视网膜新生血管发育的影 响，以及对新生血管相关因子表达的调控，探讨ANXA2在视网膜新生血管形成过程 中的作用和机制。 方法 (SiANXA2)。应用Real—timePCR和Westernblot方法检测各实验组HUVEC中膜联 胞增殖能力，划痕实验观察各实验组细胞迁移能力，成管实验评估细胞的成管能力。 并通过Real-time 的mRNA表达情况。 天后取出正常环境下饲养，构建氧诱导(OIR)小鼠模型。实验分四组：正常组(Normal， 注，视网膜铺片，荧光显微镜对比观察氧诱导视网膜新生血管形态学变化，应用 Real—time PCR检测对比两组间相应日龄小鼠视网膜ANXA2mRNA的表达变化。选择 小鼠出生后17天(P17)时间点，分别提取4组中小鼠视网膜标本，通过视网膜铺 片方法对比观察视网膜新生血管形态学变化，Real—timePCR及Westernblot检测 Timp2的表达变化。应用SPSS软件对数据行统计学处理，应用单因素方差分析进行 组间比较(PO．05)。 结果 VS 对照组HUVEC的增殖，细胞迁移数量(102．3±4．950．3±2．5)和成管数量(17．3 ±1．5VS 组(P0．05)。基因干扰后，在基因和蛋白水平均表明ANXA2在阴性干扰组表达无明 显改变，在阳性干扰组表达有明显下降，SiANXA2可以成功干扰ANXA2基因的表达。 VS102．3±4．9) ANXA2基因表达下降后，HUVEC的增殖、细胞迁移数量(41．1±1．5 VS 和成管数量(7．6±1．2 达明显下调(PO．05)。 (2)体内实验：ANXA2在视网膜血管发育旺盛期高表达，在平缓期低表达。P17小 鼠视网膜铺片发现，与OIR空白对照组和OIR阴性干扰组相比，OIR阳性干扰组视 网膜新生血管迂曲现象减轻，血管渗漏较少，微血管瘤及新生血管芽减少。视网膜 OIR空白对照组较正常组显著上调，在OIR阳性干扰组较OIR空白对照组显著下调 (PO．05)。 结论ANXA2在高糖培养的HUVEC和氧诱导小鼠视网膜新生血管中均高表达，与血管 内皮细胞内皮细胞增殖，迁移和成管能力相关，可调节新生血管相关因子的表达， 望成为防治视网膜新生血管新的靶点。 关键词： 膜联蛋白／12；氧诱导；视网膜新生血管；基因干扰 Abstract the ofANXA2inHumanumbilicalveinendothelialcells Purpose：Assessproduction invitroandin retinal llighglucose oxygen-induced (ntrVEC)cultured埘tll theeffect the neovascularizationinC57BL／6Jmousemodel．Toevaluate ofANXA2on tube inHUVEC，the of formation development proliferation,migration,and retinal the