c.jejun毒力及耐药基因的分析和粪便中的c.jejuni快速鉴定.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写………………………………………………………………………8 引言………………………………………………………………………9 第一部分空肠弯曲菌毒力及耐药基因的分析 前言……………………………………………………………………10一 日U舌……………………………………………………………………l 材料与方法……………………………………………………………10 结果……………………………………………………………………14 附图……………………………………………………………………17 附表……………………………………………………………………21 讨论……………………………………………………………………24 小结……………………………………………………………………26 参考文献………………………………………………………27 第二部分粪便中空肠弯曲菌的快速分离 前言…………………………·………………………………………··30日U吾…………………………。………………………………………一3U 材料与方法……………………………………………………………30 结果……………………………………………………………………35 附图……………………………………………………………………37 讨论……………………………………………………………………39 ／J、结……………………………………………………………………40 参考文献 …………………………………………………………40 1 结论…………………………………………………………………………4 综述空肠弯曲菌质粒及载体建立的研究及发展…………………………42 致谢…………………………………………………………………………50 1 个人简历……………………………………………………………………5 中文摘要 摘 要 目的：l选取空肠弯曲菌的12对毒力相关基因和8对耐药基因对3株吉 兰一巴雷综合征(，Guillain．Barre 1168共4种菌株进行相关基因 (Campylobacter，ejuni，C．jejuni，C．J．)及NCTCl 分析和比较，了解致C．jejuni菌株毒力基因及耐药基因性的特征，探讨 C．jejuni致GBS机制。 2传统的对空肠弯曲菌的分离实验是通过传代进行培养，经过形态学 鉴定及生化鉴定疑似空肠弯曲菌以后再做分子方面的鉴定实验，至少要花 费三天的时间。常见的特异性生化实验马尿酸实验，由于放置的时间的差 异会出现假阴性，降低分离率。而分离方法，需要经验丰富的实验员挑取 可疑单菌落，经过纯种传代后，一些毒力及耐药性可能因为这种非自然的 传代而丧失，影响我们对其分子方面的研究。本次实验旨在模拟从粪便中 直接检测出空肠弯曲菌的过程，找出特异性及灵敏度高的检测方法，通过 PCR对空肠弯曲菌进行快速而准确的鉴定。 方法：1选取空肠弯曲菌的12对毒力相关基因包括：黏附相关基因 和virBl elicJ20／sJ21，对妥布霉素一庆大霉素耐药基因intl。应用聚合酶链式反应 Chain (Polymerase 通过扩增出来的条带确定空肠弯曲菌的毒力及耐药基因的差别。 1 2利用平板传代法对NCl168菌株传代至P2代，经过生化及分子鉴 定；随机收集病区中没有腹泻及吉兰巴雷综合征的患者的新鲜粪便16份， 分别置于布氏肉汤中；将肉汤中的粪便振荡分散后，利用滤膜过滤和PBS 离心处理；在滤液中加入调整浊度后