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中文摘要 NKT细胞对不同严重程度支气管哮喘的实验研究 II NKT细胞对不同严重程度支气管哮喘的实验研究 中文摘要 NKT细胞对不同严重程度支气管哮喘的实验研究 中文摘要 目的：建立不同严重程度支气管哮喘的小鼠模型，并在此基础上研究自然杀伤 T NaturalkillerTcells NKT 细胞（ ， ）在不同严重程度支气管哮喘小鼠的作用，初步 揭示NKT在支气管哮喘发病中的机制，进而为探索支气管哮喘治疗的新方法奠定一 定基础。 方法：利用不同浓度卵清蛋白（Ovalbumin，OVA）激发致敏小鼠，建立不同严 α- (α-galactosylceramide α-Galcer) 重程度支气管哮喘小鼠模型，并利用 半乳糖神经酰 ， 激活NKT细胞对不同严重程度支气管哮喘进行干预。将雌性BALB/c小鼠随机分为 5 Normalsaline NS 1%OVA 1%OVA+α-Galcer 5%OVA 组，即生理盐水（ ， ）组， 组、 组， 组，5%OVA+α-Galcer组。于0d、14d给予各处理组小鼠腹腔注射OVA溶液致敏， NS NS 25 1 NS 1%OVA 同时 组注射 溶液做对照。在第 天雾化激发前 小时， 组、 组 和 5%OVA 组中每只小鼠用移液枪鼻腔滴入 NS ，1%OVA+α-Galcer 组和 5%OVA+α-Galcer组中每只小鼠用移液枪鼻腔滴入α-Galcer。第25，26，27天雾化吸 OVA NS NS 1%OVA 1%OVA+α-Galcer 1%OVA 入 进行激发， 组予 雾化， 组和 组予 雾化，5%OVA组和5%OVA+α-Galcer组予5%OVA雾化，雾化期间观察小鼠行为学 24 Buxco 改变。最后一次雾化 小时后，用 小鼠肺功能仪有创肺阻抗法测定小鼠的气 Airwa hyperreactivit AHR (ELISA) 道反应性（ ， ）；然后眼球取血，应用酶联免疫吸附法 检测血清OVA特异性IgE；并进行肺部灌洗，收集肺泡灌洗液（Bronchiallavagefluid， BALF），利用全自动细胞计数仪器记录肺泡灌洗液中细胞总数。流式细胞术检测 BALF Eosinophil 中各类细胞（包括中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞和嗜酸性粒细胞（ ， EOS））的比例。CBA法检测小 BALF 中细胞因子γ-干扰素 （interferon，IFN-γ）， Interleukin IL -4 -5 -13 HE 白介素（ ， ） 、 和 的水平。 染色支气管肺组织切片观察气道 炎症病理变化，根据血管、气道周围以及肺间质炎性表现情况不同进行评分(分值为 0-3分)