notch信号路在内侧颞叶癫痫形成中的作用.pdf

摘要 目的 建立海人酸小鼠内侧颞叶癫痫模型，并探讨Notch信号通路在癫痫形成过程中 的作用。 方法 技术，向模型组小鼠右侧海马内注射海人酸制备内侧颞叶癫痫模型，对照组以同样 方式注射等体积生理盐水。通过观察注射后小鼠行为学变化，以及术后不同时间点 病理学检查，判定模型建立是否成功。以、Ⅳestemblot定量检测注射后不同时间点， 免疫荧光分析其在海马组织的分布。 结果 1．模型组小鼠单侧海马内注射海人酸后，癫痫持续状态出现率为91％(62／66)， 6只小鼠因癫痫持续状态死亡，建模成功率80％(56／70)。对照组小鼠均无癫痫发 作。 2．同对照组小鼠相比，模型组小鼠术后3h即于双侧海马CAl区、CA3区、门 区及齿状回出现细胞排列紊乱、体积变小、胞核固缩等神经元受损表现，以CA3 区最显著；术后5d，模型组小鼠双侧海马各区均出现明显的神经元丢失，注射对 侧CA2区神经元相对保留；术后5w，模型组小鼠注射侧海马各区神经元进一步丢 失，伴明显的齿状回颗粒细胞散布，这和人类内侧颞叶癫痫病理表现相似，而注射 对侧海马结构得到修复。 h、16h、24h、3d、5d、1 3．模型组小鼠海人酸注射侧，术后3 w海马组织 1．257士0．456。 4．模型组小鼠术后5d，注射侧海马区NICD免疫荧光明显升高，且主要集中 在齿状回颗粒细胞下层。 结论 1．以C57BL／6小鼠为对象，通过海人酸单侧海马内注射建立内侧颞叶癫痫动 物模型是可行且可靠的。 2．NICD表达量在内侧颞叶癫痫形成过程中上调，且集中分布在齿状回颗粒细 胞下层，提示Notch信号通路可能参与了内侧颞叶癫痫的形成，但其具体机制还需 进一步研究。 关键词 内侧颞叶癫痫；海人酸；动物模型；发病机制；Notch信号通路 ．气． ABSTRACT objective Establish modelinadultmiceaIld role epilepsy the mesialtemporallobe irⅣestigate ofNotch signalingduringepileptogenesis． Methods ofkaillic tlledorsal Stereotaxicallyu11ilatemlinjectionacid(KA)intohippoc锄pus ofadultC57BL／6mice．No肋alsalineforthecontrol thes锄e groupby process． EValuate memodels seizures and byobseⅣing postinjectionexamiIling of intracelIular llistopa_t110109icalconsequencesllippoc锄pus．Notch the elementof Notch blotwas todetectNICD key signaling．Westempe哟med，as of at time different expressionllippoc锄pus pointspoSt immunofluorescencewaSusedtodemollst