β-榄香烯对祼移植瘤的放射增敏作用与血管形成的相关性研究.pdf

B一榄香烯对裸鼠移植瘤的放射增敏作用 与血管形成的相关性研究 硕士生姓名： 谢冰冰 {旨导教师：刍F丽士蜀教授 指导小组： 李国权副教授 专业名称： 肿瘤学 摘要 D．榄香烯的放射增敏作用在既往的基础研究中已经得到证实，但是对其放射 增敏作用的机制研究目前还主要停留在体外实验阶段。由于p．榄香烯是作用于多 靶点的药物，对其放射增敏机制尚未完全阐述清楚，仍有诸多未知领域值得深入 探索，如B一榄香烯的放射增敏机制是否与其抑制肿瘤的血管形成相关。 目的：本实验通过建立人肺腺癌A549细胞株的裸鼠移植瘤模型，探讨B一榄 香烯对肺腺癌的放射增敏作用机制是否与其抑制肿瘤血管形成相关，为放射增敏 治疗提供新的理论依据。 方法：本实验采用细胞悬液接种法构建成人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤模 型，观察肿瘤的生长情况，并绘制裸鼠移植瘤的生长曲线。将达到0．8～1．Ocm3 瘤体积的雌性裸鼠随机分成四组，每组5只：对照组(NaCl)、药物组(增敏剂 blot方 量)、放疗组、药物(增敏剂量)+放疗组。采用RT—PCR方法及Western 法检测各组VEGF的mRNA及蛋白的表达水平，同时应用免疫组化方法检测各组VEGF 和CD34的表达情况。 结果： 1．成功建立裸鼠移植瘤模型，约4～6W体积达到0．81．Ocm3，根据体积变 化情况绘制移植瘤的生长曲线。 2．RT～PCR结果显示药物组的VEGFmRNA水平的表达显著高于空白组，差异有 统计学意义(PO．05)：放疗组的VEGFmRNA表达明显高于空白组，差异有统计 学意义(P0．01)；而联合组的VEGFmRNA水平却明显低于空白组，药物组及放疗 组，差异有统计学意义(PO．01)。 3．Western blot结果显示药物组的VEGF蛋白表达略低于空白组，但是差异 没有统计学意义(P0．05)；放疗组的VEGF蛋白表达与空白组比较明显增强， 差异有统计学意义(PO．01)；联合组VEGF表达与其它各组比较明显减弱，差异 有统计学意义(PO．01)。 4．免疫组化结果显示药物组的VEGF表达略低于空白组，但是二者差异没有统 计学意义(PO．05)；放疗组的VEGF表达与空白组比较明显增强，差异有统计 学意义(PO．01)；联合组的VEGF表达与其它各组比较明显减弱(PO．01)。 5．移植瘤中CD34(ⅢD)的免疫组化结果与VEGF的表达结果基本一致。药 物组的微血管个数略低于空白组，但是二者的差异没有统计学意义(p0．05)；放疗 组与其它各组比较，微血管个数表达明显增高，差异有统计学意义QO．01)；联合 组微血管个数与空白组、药物组及放疗组比较明显降低，差异有统计学意义 (pO．01)。 结论： 1．增敏剂量的B一榄香烯轻度抑SUVEGF蛋白的表达，单纯放疗明显诱导VEGF 蛋白的表达。增敏剂量的B一榄香烯与放疗联合明显抑锖OVEGF蛋白及的表达。 2．增敏剂量的B一榄香烯轻度抑$!ICD34的表达，单纯放疗明显诱导CD34的表 达。增敏剂量的B一榄香烯与放疗联合明显抑$IJCD34的表达。 3．增敏剂量的B一榄香烯与放射治疗联合应用可通过抑制裸鼠移植瘤的VEGF 表达，进而抑制肿瘤的血管形成，提高肿瘤的放射敏感性。说明VEGF可能是B一榄 香烯放射增敏作用的靶点之一。 关键词：B．榄香烯放射治疗肺腺癌A549细胞株裸鼠移植瘤血管形成 2 Effect Combinedwith on of[I-elemene Radiotherapy the of Adenocarcinoma AngiogenesisLung