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Smad l在糖尿病大鼠肾脏中的表达及作用 硕士生姓名： 马小慧 指导教师： 程丽静教授 专业名称： 内科学 摘 要 目的：糖尿病肾病是全球终末期肾脏病的最常见病因，严重危害人 类的健康。糖尿病肾病的基本病理改变为肾小球肥大、基底膜增厚及系 膜基质聚集，最终导致肾小球硬化。近年来，Smads蛋白超家族在肾小 球硬化方面的作用受到国内外学者的关注。本实验通过观察Smadl在糖 尿病大鼠肾组织中的表达，探讨Smadl与肾小球系膜基质积聚的关系， 并通过观察ATl受体拮抗剂对Smadl表达的影响，探讨其在延缓肾脏纤 维化中的可能作用机制。 方法：随机选取SD大鼠64只，分为对照组l6只、糖尿病组24只 尿病动物模型，正常对照组大鼠予等量柠檬酸缓冲液腹腔注射。用药组 大鼠自第3周起予奥美沙坦(0．6mg／kg)灌胃治疗，其他大鼠给予等量生理 盐水灌胃处理。分别于3周、4周、l2周及20周处死大鼠，测定糖化血 红蛋白、血肌酐及肾重指数，并留取24小时尿量，测定尿肌酐及尿白蛋 染色光镜下病理观察。并采用免疫组织化学、Westernblot方法检测肾脏 Plus6．O)进行相 mRNA的表达，并采用病理图像分析软件(美国Image．Pro 关性分析。 结果：1．随着病程延长，糖尿病组大鼠的糖化血红蛋白(HBAlc)、血 肌酐(SCr)、肾重指数、24h尿蛋白均呈上升趋势。其中糖尿病组各时间 点的糖化血红蛋白、24小时尿量及24小时尿蛋白较对照组明显升高 (pO．05，p0．01)，示糖尿病动物模型成功。 2．免疫组化显示，糖尿病大鼠Smadl主要表达于肾小球系膜区，肾 小管略有表达，而对照组表达很少。Westernblot结果示3周时糖尿病组 Smadl在蛋白水平的表达量较对照组升高1 6倍(p0．01)，20周时用药组 I 证实，糖尿病大鼠肾组织Smadl表达明显增高，奥美沙坦可下调其表达 水平。 3．免疫组化显示，对照组肾小球基底膜和系膜区ColⅣ有表达，而 糖尿病大鼠表达明显增加，且随着病程延长呈上升趋势。RT-PCR结果显 (pO．05)。 4．Western blot及免疫组化还显示，自3周起，糖尿病组大鼠肾组织 Smadl在蛋白水平表达较对照组开始升高，此时24小时尿蛋白排泄量也 Plus6．0)结果显示，Smadl 增高。又经病理图像分析软件(美国Image．Pro 相关性相对较弱(r=O。45，p=0．043)。 ＼ 尿病肾病的发生发展，且Smadl将可能成为糖尿病肾病早期诊断的参考 指标。 2．ATl受体拮抗剂可能是通过抑制Smadl信号转导途径延缓肾脏纤 维化的进程。 关键词：Smadl糖尿病肾病 肾小球硬化 2 andndi1 d1 1nR 0IofSmad。in ExpressionniPlicationplication ofdiabetic rat nephropathy ■ ■ V Master candidate：XiaohuiMa degree Supervisor：ProfessorLijingCheng Major：