振 ~补充版分子生物学复习答案.docVIP

分子生物学 六月你好???O(∩_∩)O哈哈~ 一、名词解释 10分 1、生物大分子（biomacromolecule)：是指生物体内由分子量较低的基本结构单位首尾相连形成的多聚化合物。包括核酸、蛋白质和多糖。 2、插入失活效应：因DNA片段的插入而导致编码基因失活的现象。 3、核酸分子杂交：存在互补序列的不同来源的核酸分子,以碱基配对方式相互结合形成DNA-DNA或DNA-RNA杂交体的过程。携带外源DNA并使之在宿主细胞中表达的载体。(degeneracy)。对应于同一氨基酸的密码子叫同义密码子。 7、起始中止密码子：MRNA上每3个相邻的核苷酸编码PRO多肽链中的一个AA,这三个核苷酸就称为一个密码子或三联体密码。 8、操纵子：操纵子是原核生物基因表达的单元，它包括被协同调节的基因(结构基因)和被调节基因的产物所识别的调控元件。 9、内含子：断裂基因中外显子的间插序列，可参与前体RNA的转录，但其转录的RNA序列于转录后的加工中被切除，不包括于成熟的RNA分子中． 10、开放阅读框(ORF)：是基因序列的一部分，包含一段可以编码蛋白的碱基序列，不能被终止子打断。 断裂基因(or interrupted gene)：编码序列不连续的间断基因，即编码序列在DNA分子中是不连续的，被非编码序列隔开，呈镶嵌排列的断裂形式。 基因工程定义：狭义的基因工程仅指用体外重组DNA技术去获得新的重组基因；广义的基因工程则指按人们意愿设计，通过改造基因或基因组而改变生物的遗传特性。如用重组DNA技术，将外源基因转入大肠杆菌中表达，使大肠杆菌能够生产人所需要的产品；将外源基因转入动物，构建具有新遗传特性的转基因动物；用基因敲除手段，获得有遗传缺陷的动物等。2）在速率区带离心中，混合物被加入离心管中预先铺好的适当介质的浓度(形成密度)梯度层。通过离心，不同成分将根据他们的沉降系数以不同的速度下沉并形成相互分离的带或区带． 细胞器的分离（3）等密度离心：也称沉降平衡法，离心时颗粒依其密度的不同而分别沉降或向上漂浮，直至移至与其自身的密度相同的溶剂梯度为止，其结果是依样品物质密度的不同在梯度溶剂中形成一个个区带） 2、载体质粒：所有的质粒载体都有三个共同的特征：一个复制子、一个选择性标志和一个克隆位点。RNA 基因 按其功能分：结构基因：Structural gene / 调节基因：Regulator 4、英文缩写 BAC细菌人工染色体 （BAC载体）（bacterial artificial chromosome, BAC) 5、文库类型：依据所用DNA的来源，可将构建的基因文库分为基因组文库和cDNA文库 6、载体包含什么文件 7、基因组测序的动物有哪些：在人类基因组计划中，还包括对五种生物基因组的研究：大肠杆菌、酵母、线虫、果蝇和小鼠，称之为人类的五种“模式生物”。 古细菌是原核生物的第二个亚门 常生活于极端环境（高盐/高热/高酸/含硫热泉等） 古细菌与真细菌结构上相似 古/真细菌的核糖体RNA(rRNA)的分子进化差异明显 有不同于真细菌的独特生化特性 2、同尾酶：些来源不同的限制酶，识别及切割序列各不相同，但却能产出相同的粘性末端，这类限制酶称为同尾酶。 3、大肠杆菌（E.coli) 菌学家Theodor Escherich。生长条件简单，有多种生理生化过程。人类发现存在有性生殖的第一种细菌。可供应细菌病毒的生长 兼性厌气菌/Ｇ-/容易培养 / 菌株多（strain) / 遗传物质为染色体DNA和质粒DNA / 多种酶类 / 合成代谢／分解代谢 核酸代谢：DNA聚合酶/RNA聚合酶/限制性内切酶 大肠杆菌的染色体 双股环状DNA 1400以上的基因 基因组长度为4.6х106 bp 编码3000种蛋白质 五、问答 5*8分 1外显子的特点: 外显子：断裂基因中含有蛋白质编码信息的部分．每个外显子均编码一个完整蛋白质的特定部分． 外显子的一般特点 1、外显子在DNA中的次序与其mRNA一致 2、不同物种的相关基因的外显子序列通常是保守的．利用这种保守性可以分离基因． 3、外显子通常短小，典型的外显子编码不到100aa.　只有外显子的突变才会影响蛋白质的序列． 2设计实验把给出基因蛋白，表达出来并且鉴定。 3 PCR原理/ 怎么用/ 有啥用 在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。 1、变性：通过加热使DNA双螺旋的氢键断裂，双链解离形成单链DNA 。 2、退火：当温度突然降低时，反应体系中引物和其互补的DNA模板在局部形成杂交链。 3、延伸：在DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸（dATP、dCTP、dGTP、dTTP）及Mg2+存在条件下，5’→3’的聚合酶催化以引物