苏云金杆菌辅助蛋白P20对杀虫晶体蛋白Cry1Ab表达影响.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( *# 年 月 $%% !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-./-01-2 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 苏云金杆菌辅助蛋白!# 对杀虫晶体蛋白$%’() 表达的影响 汤慕瑾 袁美妗 陈建武 师永霞 曾少灵 余健秀 庞 义 （中山大学生物防治国家重点实验室，广州 #!%$# ） 摘 要 苏云金杆菌（ ，简称 ）杀虫晶体蛋白 因其 半端缺少了一段含 个半胱氨酸 .+0#,,) /)*#$1#%$# F/ G2H!61 G3 7 的氨基酸序列而导致蛋白的不稳定，报道苏云金杆菌辅助蛋白I$% 帮助G2H!61 蛋白的表达及晶体的形成。利用穿 梭载体 构建 个表达质粒，即 、 和 ，个质粒都含有 基因，不同在于 没有 .J8!%! .8!F .I!F .KI!F 0*2 !61 .8!F 3 $% 基因， 含有 全基因，而 不仅含有 全基因，且在 基因前插入 （）启动子。分别将这 个 .I!F 3 $% .KI!F 3 $% 3 $% 0*2 !6 D 表达质粒经电转化到苏云金杆菌晶体缺陷型菌株 中，获得转化菌株 、 和 。 表明 G2HF 8!F I!F KI!F L-?/-2E 1)(/ 基因在这 株菌中均表达了 的蛋白，部分降解为大约 的蛋白。蛋白定量分析显示，株菌 0*2 !61 !% MK 4% MK !% 蛋白量的比为 ，降解后的 蛋白量的 比为 ， 蛋白总量的比为 。镜检发 MK !N !*7 N !O# 4% MK !N !* !N !*4 G2H!61 !N !N$ N !O4 现， 在 株菌中都形成典型的菱形晶体，其晶体大小为 。生物测定结果显示，个菌株对 G2H!61 8!F P I!F P KI!F 棉铃虫（ ）均具有明显的杀虫活性，三者的 差异不显著。研究表明， 对 基因的表达 4%,#0(5%*3 + +*6#1%*+ QG I$% 0*2 !61 #% 和晶体形成均有