第九章：原生质体培养与体细胞杂交摘要.pptVIP

* 物理选择法 利用原生质体的大小、颜色、漂浮密度等差异进行选择 。 * 形态鉴定：根据双亲的形态学性状观察进行鉴定。 五、体细胞杂种植株的鉴定 * 杂种细胞的染色体数应该是双二倍体；利用染色体显带技术，以亲本染色体为对照，对细胞杂种的染色体数目、形态和带型进行观察。 细胞学鉴定 * Somatic hybrids have ALL of the chromosomes from each parent plant * 根据亲本和杂种同功酶谱的差异来鉴别杂种。有的呈双亲谱带的总和、有的出现新谱带或丢失部分亲本谱带。 同功酶鉴定 * 分子生物学鉴定 在DNA水平上对亲本和杂种植株遗传差异进行鉴定的一种技术。 THE END * * The different protoplast culture techniques (modified from Matsumoto and Oka 1998). * * * 胞质体，对细胞用细胞松弛素B处理后,离心去除细胞核,剩余的细胞结构. 为实现油菜细胞质基因组杂交，武汉大学杨弘远等利用吖啶橙结合光照处理，造成了核不可逆失活，从而可以认为其原生质体为胞质体。 * 一般叶片只用纤维素酶和果胶酶, 悬浮细胞一般还会加入半纤维素酶. * 加入缓冲剂如MES（乙基磺酸）对保持酶解物的酸碱环境起缓冲作用 * 盐