丙戊酸钠对体外养的人晶状体上皮细胞增生的抑制作用.pdfVIP

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 丙戊酸钠对体外培养的人晶状体上皮细胞增生的抑制作用 华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科 2006 级硕士研究生：田博 导师：王智 副教授 目的：探讨丙戊酸钠（sodium valproate，VPA ）对体外培养的人晶状体上皮细胞 (human lens epithelial cells,HLECs)增生和细胞周期的影响。方法：采用不同浓度 的VPA(0.5 mmol ·L-1 、1 mmol ·L-1 、2 mmol ·L-1 、4mmol ·L-1)作用于人晶状 体上皮细胞,四甲基偶氮唑蓝法（MTT ）检测在不同时间点（24h 、48h 、72h ）VPA 对细胞增生的抑制作用；流式细胞仪测定VPA(1 mmol ·L-1 、2 mmol ·L-1)作用 于HLECs 48h 后细胞周期分布情况；Western-blot 测定在VPA(1 mmol ·L-1 、2 mmol ·L-1)作用于HLECs 48h 后，P21 （细胞周期依赖性激酶抑制因子）在蛋白 质水平表达量的改变。结果：MTT 检测显示VPA 对体外人晶状体上皮细胞的增 生的抑制作用呈时间和剂量依赖性。VPA 作用 48h 后，各药物浓度组(0.5 mmol ·L-1 、1 mmol ·L-1 、2 mmol ·L-1 、4mmol ·L-1)细胞生长抑制率分别为11.05%, 21.58% ， 26.67% 和 38.25% ，流式细胞仪检测显示VPA 可阻滞HLECs 由G0/G1 期向S 期转换，使G0/G1 期细胞增多，S 期细胞减少。经2 mmol ·L-1VPA 作用 48h ，G0/G1 期及 S 期细胞比例分别为 85.40±3.90% 和 7.35.±1.47% ，较阴性对 照组（53.14±1.71% 和 35.31±1.14% ）差异具有统计学意义（P0.05 ）。Western blot 检测发现VPA 可促进P21 蛋白质水平的表达。VPA 处理48h 后，各组平均 灰度比值分别为0.582 ±0.082(1 mmol ·L-1)和0.914 ±0.113(2 mmol ·L-1) ，与阴 性对照组（0.303 ±0.029 ）比较，差异有统计学意义（P0.05 ）.结论：VPA 可以 通过促进P21 表达，使人晶状体上皮细胞阻滞于G0/G1 期，最终抑制人晶状体 上皮细胞增生。 【关键词】丙戊酸钠；人晶状体上皮细胞；增生；后囊膜混浊 2 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 Inhibitory effect of sodium valproate on proliferation of human lens epithelial cells in vitro Department of Ophthalmology, Union Hospital of Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022,Hubei Province ，China 2006 Master Candidate: Tian Bo Tutor: Professor Wang Zhi Abstract [Abstract] Objective To investigate the effects of sodium valproate (VPA) on the proliferation and cell cycle in vitro. Methods HLECs were -1