局部温热疗法治孢子丝菌病模型小鼠疗效观察及温热对皮损内ifn-γ表达的影响.pdfVIP

·中文论著摘要· 局部温热疗法治疗孢子丝菌病模型小鼠疗效观察及温 热对皮损内IFN-丫表达的影响 刖吾 局部温热疗法是孢子丝菌病的治疗方法之一。 目前认为，该方法的机制是其直接作用于病原菌，同时影响机体的免疫功能。 本研究通过动物实验观察温热疗法的疗效并通过免疫组化的方法研究温热治疗后 皮损内细胞因子的变化。从机体局部细胞免疫功能变化的角度探讨热疗的作用机 制。 实验材料和方法 一、温热疗法治疗孢子丝菌病模型小鼠疗效观察 (一)材料 申克孢子丝菌菌株(12628)来自中国医科大学附属第一医院皮肤科，为皮肤淋 巴管型孢子丝菌病患者的分离株。 两周待出现皮损后随机分为对照组和治疗组，每组15只。 (二)方法 治疗组接种2w后用恒温水浴箱对小鼠尾部皮损局部水浴热疗，温度43℃，3 次／w，15min／次，共12次。对照组接种后不予任何处置。热疗开始即观察治疗反 应，如皮损大小变化，炎症反应强度等。温热治疗后观察皮损消退记为有效，计 算两组有效的百分比。 (三)统计学处理 所得的数据用SPSSl3软件进行分析处理，组间的比较用校正的卡方检验， 检验效能为0．05。 二、局部温热治疗对皮损内IFN-Y表达的影响 (一)材料 动物模型及温热疗法同上 (二)方法及数据统计 20只小鼠分治疗组和对照组，每组10只。加热2次后各组小鼠接种处活检， 做HE、PAS染色和免疫组化皮损内IFNff染色。 光学显微镜下观察IFNff表达阳性细胞，胞浆红染为阳性，于200倍光镜下 每张切片选3个真皮内炎细胞浸润明显的视野，计数视野内阳性细胞占同类细胞 的百分比，表达10％记为阴性(一)。阳性细胞的标本包括四个等级：10％--25％ 细胞染色记为(+++)，75％浸润细胞染色记为(++++)。 (三)统计学处理 U检验，检验效 采用SPSSl3统计分析软件处理数据。使用Mann--Whimey 能为0．05。 实验结果 一、温热对孢子丝菌病模型小鼠疗效的观察 接种后一周左右出现皮损。第二周、第三周皮损最显著。主要表现为接种处 红肿、结节、溃疡、溢脓及结痂。伴随热疗次数增加治疗组皮损红肿消退、溃疡 愈合及结痂均较对照组快。接种后一月所有小鼠皮损开始逐渐消退，但是加热组 消退更加明显。加热六次即接种后一月治疗组消退的占60％，而对照组占13．3％。 加热十二次即接种后四十天加热组占80％，对照组占20％。以上P值均小于0．05， 有统计学意义。 二、温热对孢子丝菌病模型小鼠皮损内IFN．丫表达的影响 IFN—y在表皮呈弥漫性表达，基底膜向上有减弱的趋势。真皮毛囊及皮脂腺 2 结构也有表达，呈弥漫性淡染。以上正常皮肤染色结果与热疗组及对照组基本相 同。真皮阳性主要表达在单核淋巴样细胞的胞浆内。而正常皮肤真皮几无表达。 热疗后真皮IFN-y表达较对照组增多。治疗组和对照组有统计学差异。 结论 ①孢子丝菌病小鼠模型有自愈倾向。 ②温热疗法治疗孢子丝菌病模型小鼠有效。 ③温热治疗后孢子丝菌病模型小鼠皮损IFN．q表达增加。 关键词 温热治疗；孢子丝茵病；小鼠；IFN-y)免疫组化 3 ·英文论著摘要· Effectoflocal onmice hyperthermia and’esionalaniesiona lesions snoiselsserpxe吖NFIl■州吖expreSSlOn Introduction