急性髓系白血病胞vcam-1、cd34、cd117的表达研究.pdfVIP

中山大学硕士学位论文 1 急性懿系白血病细胞VC肌1、CD34和CDl7的表达研究 专 业 内科学 硕士研究生 庞文正 导 师 侯丽君 摘 要 急性白血病(atueleukemiaAL)是一组异质性恶性克隆性疾病，系造血干细胞 或祖细胞突变引起的造血系统恶性肿瘤，发病时大量的白血病细胞在骨髓中增殖， 抑制正常造血，并广泛浸润其他器官和组织。研究发现在白血病细胞不断增殖、浸 润的过程中，粘附分子(adhesionmolecules)发挥了重要作用，而血管细胞粘附分 celladhesionmolecule 子(vascular l，VCAM．1)作为其中的一员，可介导细胞与 细胞、细胞与细胞外基质之间的粘附，并可选择性的促进单个核细胞的粘附。以往 研究表明：VCAM．1主要来源于非造血细胞，如骨髓基质细胞、内皮细胞、组织巨 噬细胞及树突状细胞，最后研究发现在急性白血病初诊患者血液中VCAM．1的水平 异常升高，推测这种高水平的VCAM．1可能与白血病细胞自身表达的VLA4相结合， 通过激活P13K依赖的信号途径，在白血病的增殖、分化、迁移、浸润中发挥重要作 用，有研究证实，白血病细胞存在自分泌功能，可以分泌一些细胞因子及粘附因子 促进自身的增值和浸润。国外学者研究发现在某些类型的急性髓系白血病细胞可以 表达VCAM-1，引起人们的关注。 CD34是一种分子量为105-．一120KD的糖蛋白，是干细胞、祖细胞的标志，它是 ～种阶段特异性抗原。最近有研究发现，白血病细胞同样具有CD34抗原的表达，且 在M0、M1、M2等分化程度较差的白血病类型当中CD34多有高表达，临床常出现 髓外浸润表现，而且CD34+过度表达也可能是不良预后因素之一。 CDl 17是c·kit受体(c-kit R)膜外区分子表面抗原标志，其配体为干 receptor,c．“t 细胞因子(SCF)，SCF是重要的造血生长因子，同其他细胞因子协同作用可刺激造 血干／祖细胞的增殖和分化。研究表明CDl17主要表达在髓系幼稚细胞上，正常的骨 髓造血干细胞、定向祖细胞上CDll7表达率仅为4％。但在急性髓系白血病细胞上存 在CDl17高表达，多出现在M0、M1分化程度较低的急性髓系白血病类型，并且也 中山大学硕士学位论文 易出现髓外浸润表现，似与CD34有良好的相关性。在CD34与CDl17表达的急性髓 系白血病细胞上，VCAM一1表达如何，是否具有相关性，目前尚不明确，本实验通过 相关性，进一步了解VCAM．1的来源，并试图为急性髓系白血病的预后判断提供新 的检测指标。 材料和方法 1、材料 1．1标本的来源：16例白血病骨髓标本均来自我院血液科住院期间的急性髓系白血病 患者(经患者同意后)。 1．2采集时间：2008．4至U2009．3。 1．3采集时期：16例骨髓标本采集于初诊时，2骨髓标本例采集于急性髓系白血病复 发时。 1．4符合条件：以上患者诊断均符合2007．8张之南、沈悌主编的第三版《血液病诊断 及疗效标准》关于急性白血病的诊断标准及复发、难治的诊断标准。 2、实验步骤和方法 取符合条件的患者骨髓液2ml(肝素钠抗凝20IU／rId)，并分别在PE标记的 VCAM．1、CD34、CDl 17荧光单抗20uI中NA骨髓单个核细胞106个，室温避光 15分钟。然后溶血法去除标本中的红细胞，离心、去上清。加入固定液500ul后 上机检测。 3、统计方法 采用SPSS Means--I：Std表示，均数的组间比较采用秩和检验或T检验(根据数据是否符合正 析，P0．05为差异有统计学意义。 结 果 1．急性髓系白血病细胞VCAM