硼替佐米对k52细胞内ship基因表达的影响.pdf

L 目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………3 研究论文硼替佐米对K562细胞内SHIP基因表达的影响 前言………_………………………………………………………6刚吾………．：……………………………．…………………………O 材料与方法…………………………………………………………6 结果…………………………………………………………………ll 3 附图…………………………………………………………………1 附表…………………………………………………………………19 1 讨论…………………………………………………………………2 1 结论…………………………………………………………………2 参考文献……………………………………………………………22 综述硼替佐米在白血病中的应用进展…………………………………26 致谢………………………………………………………………………32 个人简历…………………………………………………………………33 中文摘要 硼替佐米对K562细胞内SHIP基因表达的影响 摘 要 目的：慢性粒细胞白血病(Chronic myelogenous 一种获得性多功能造血干细胞突变后克隆性增殖性疾病，Ph染色体和 bcr／abl融合基因的发现及相关研究为慢粒的诊断和治疗做出了很大的贡 献。9号和22号染色体易位，形成BCR．ABL融合基因，导致酪氨酸激酶 活性增加，这是慢性粒细胞白血病的发病机制【l也】。目前CML的一线治疗 是甲磺酸伊马替尼，酪氨酸激酶抑制剂，可以使大多数的慢粒慢性期的病 人获得完全细胞遗传学缓解【31。但是，获得微小残留病(82％)的病人数明 显比获得完全细胞遗传学缓解(66．3％)多，停药会使疾病复发【4】。造血干 细胞很可能是微小残留病的根源，对甲磺酸伊马替尼是耐药的【51。微小残 留病的存在和BCR．ABL融合基因的突变引起对甲磺酸伊马替尼的耐药已 被证实【6-9】。新的酪氨酸激酶抑制剂出现，包括达沙替尼、尼罗替尼、其 它的酪氨酸激酶抑制剂，这些药物对甲磺酸伊马替尼耐药的慢粒患者显示 了很好的临床疗效[10-11】。但是，慢粒的造血干细胞对达沙替尼、尼罗替尼、 其它的酪氨酸激酶抑制剂是不敏感的[12-14】，而且任何酪氨酸激酶抑制剂对 T3151 BCR．ABL融合基因突变是无效的【l51。因此，我们针对造血干细胞 和BCR．ABL基因突变寻找新的方法。硼替佐米是第一个进入临床的蛋白 酶体抑制剂，目前广泛用于治疗复发及难治的多发性骨髓瘤【161。研究显示 硼替佐米在体外对多种恶性肿瘤细胞株均有一定的抑制作用【17】，但关于其 机制的研究尚不明确。本实验选用硼替佐米和5．杂氮胞苷，单药及联合干 预后，动态观察其对K562细胞株生长抑制作用和凋亡，以及用药前后对 SHIP基因的影响，并探讨其可能的机制，为筛选新的治疗CML的药物提 供参考。 替佐米和5．杂氮胞苷单药及联合用药干预组和非干预组。非干预组为对照 胞增殖抑制率。应用流式细胞术检测细胞凋亡率。应用逆转录聚合酶链反 应法对处理前和处理后K562细胞进行SHIPmRNA水平的检测。 中文摘要 结果： lMTT结果显示：单药组与联合组均抑制K562细胞的增殖，在一定范围 内与药物浓度及作用时间呈正相关。联合组抑制作用明显优于单药组。 2流式细胞仪结果显示：单药组与联合组均使K562细胞凋亡率增加，且 作用也呈时间和药物浓度依赖性。联合组凋亡率明显高于单药组