精神分裂症血清肽和microrna表达差异研究.pdf

目 录 1 精神分裂症血清多肽和 MicroRNA 表达差异研究„„„„1 1.1 中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 1.2 英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 1.3 前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„8 1.4 第一部分 精神疾病血清多肽谱的比较分析„„„„„12 1.4.1 材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„51 1.4.2 结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„51 1.5 第二部分 精神分裂症血清特征多肽及其鉴定 „„„„24 1.5.1 材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„51 1.5.2 结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„51 1.6 第三部分 无自知力精神分裂症血浆microRNA的差异表达 1.6.1 前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„22 1.6.2 材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„51 1.6.3 结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„51 1.7 讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„24 1.8 结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„30 1.9 参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„62 2 英汉缩略词对照表„„„„„„„„„„„„„„„„„71 3 致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„72 4 课题资助来源„„„„„„„„„„„„„„„„„„„73 5 在读期间发表的论文目录„„„„„„„„„„„„„„89 摘 要 目的：精神分裂症 （Schizophrenia，Sz ）是一类以精神活动与环境不 协调为主要特征的常见精神病，严重影响患者身体健康和生活质量，给社 会和家庭带来精神上和经济上的重大负担。尤其是进行司法鉴定或采取强 制医疗措施时，由于没有客观的实验依据，常常会造成非常尴尬的局面。 Sz 其发病率在全世界不同的文化、地理区域中均为 1%左右，而且有逐年 上升的趋势。目前，精神分裂症的诊断主要依据临床症状表现，随着分子 生物学的发展，蛋白组学和基因组学已成为研究精神疾病的新途径。其中 表面增强激光解析电离飞行时间质谱（Surface enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry ，SELDI-TOF-MS ）技术在筛选精 神分裂症蛋白标志物方面取得了重大成果。通过对不同精神疾病分组实验 研究，筛选差异表达的多肽和 MicroRNA ，以此提供诊断的客观依据，探 索无自知力精神病患者的鉴别方法，进而研究其病因及发病机制。 方法：受试对象分为 6 组共 145 例，其中精神分裂症 33 例，焦虑障碍 30 例，抑郁症 14 例，器质性精神障碍 11 例，精神分裂症直系亲属 36 例， 健康人 21 例。采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS） 技术和弱阳离子芯片（Ciphergen ProtienChip CM10）采集各组血清多肽 质谱指纹图，Biomaker Wizard 软件筛选出差异多肽组。分将筛选出具有 显 著 统 计 意 义 的 蛋 白 质 峰 蛋 白 数 据 库 (Swiss 蛋 白 数 据 库 http///tools/tagident.html)进行查询，从中选取可能的 和可得到 ELISA 试剂盒的血清多肽进行鉴定。其结果通过单因素方差分析 法和多独立样本检验统计出具有显著差异性的血清多肽。选取无自知力精 神分裂症组、精神分裂症治疗后缓解期组、健康人组例血清标本使用美国 昂飞公司高通量的微阵列筛选差异表达的 MicroRNA 。经过 ＳＡＭ软件、 监督聚类分析软件初步确定差异表达的特征 MicroRNA, 合成特征 MicroRNA 引物进行初步验证实验。 结果： １.在 6 组受试对象中共筛选出１５个差异明显的血清多肽 (P0.01) ，分子量分别为 2058.06±0.70Da 、2159.68±0.60Da 、2651.54±