第二章 分子克隆工具酶详解.pptVIP

4.1 碱性磷酸酶 功能： 催化核酸脱5`-磷酸基团，使DNA或RNA片段5`-P末端转换成5`-OH末端。 来源： 有两种，分别来自于大肠杆菌和小牛肠道，前者叫bacterial alkaline phosphatase (BAP); 后者叫calf intestinal alkaline phosphatase (CIP)。 碱性磷酸酶的活性 末端转移酶(terminal transferase): 是末端脱氧核苷酸转移酶简称。来源于前淋巴细胞和分化早期的类淋巴细胞。 功能： 催化5`脱氧核苷三磷酸进行5`→3`方向的聚合作用, 逐个将dNTP分子加到线性DNA分子3`-OH端。 4.2 末端转移酶 末端转移酶的催化作用 用途： (1) 主要用于给外源DNA片段和及载体分子加上互补同聚物尾巴； (2) 标记DNA片段的3`末端。 4.3 T4多核苷酸激酶 来源：T4 polynucleotide kinase来源于T4噬菌体感染的大肠杆菌细胞。 功能：催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA的5`-OH末端（图）。 T4 多核苷酸激酶的活性（正向反应） DNA/RNA（单链或双链） T4多核苷酸激酶的交换活性 用途： （1）标记DNA的5`-末端； （2）使缺失5`-P末端的DNA发生磷酸化作用。 4.4 S1核酸酶 来源：来源于稻谷曲