rna干扰he-2neu基因对子宫内膜癌ishikawa细胞增殖及其对孕激素敏感性的影响.pdfVIP

·中文论著摘要· 胞增殖及其对孕激素敏感性的影响 刖 舀 子宫内膜癌(Endometrial 之一，近年来其发病率有增高的趋势，尤其在欧美一些国家已跃居女性生殖道恶 性肿瘤的首位。各型内膜癌有不同程度的HER-2表达，说明HER-2在各型子宫内 膜癌的发生、发展过程中起一定作用。近年研究发现，子宫内膜癌中HER-2的表 达程度与患者的不良预后相关。RNA干扰(RNA 起来的新的基因阻断技术，是指通过21-23 异性的基因沉默，现已成为分子生物学研究中最为活跃的热点之一。与反义RNA 相比，RNAi技术的成功率更高，并能使目的基因表达降至一个更低的水平，达到 基因敲除效果。作为一种高效、特异性的基因敲除工具，RNAi不仅可用来研究功 能基因组，同时也为基因治疗提供了广阔前景。 目 的 殖及对孕激素敏感性的影响。 方 法 CMV 时后，采用Western V试剂盒检测细胞凋 Blot法检测p185蛋白的表达，Atmexin 亡，予转染72h流式细胞术检测细胞周期的变化：于转染12h后各组分别加入不 同浓度孕激素作用48h，用MTT法检测不同浓度孕激素分别作用于未转染及转染 后的细胞增殖率的改变。 1 结 果 测序证实成功构建HER．2／neu的2个短发夹状siRNA真核表达质粒，转染 Ishikawa细胞后，转染了特异性HER-2／neu shRNA的细胞p185蛋白水平均明显低于 转染无义对照序列的细胞；细胞凋亡分析显示，HER。2／neu基因沉默的细胞凋亡率 72h后处 明显增加(PO．01)；与非特异性对照组及空白对照组相比，转染shRNA 于Gd6l期细胞增多，同时S期的细胞比例减少；MTT分析显示RNAi与孕激素联合 作用组细胞增殖率明显低于非特异性干涉组及空白对照组(P0．01)。 结论 的凋亡并阻滞细胞周期于Go／Gl期；HER．2／neu基因沉默与孕激素联合作用的 Ishikawa子宫内膜癌细胞增殖明显受抑制并且细胞对孕激素的敏感性显著增高。 关键词 RNA干扰：HER-2／neu基因；子宫内膜癌；孕激素；基因治疗 2 ·英文论著摘要· EffectsofRNAionHER--2／neuofIshikawa gene and effectontheir endometrialcancercells the to sensitivityprogesterone Introduction ofthemostcommonseen tumors Endometrial one Carcinoma(EMC)is malignant offemale tract．Recentincidenceratehasthe to genital years，its greattendency