慢病毒载体介导annexin a10瘤内注射对hepg2细胞皮下移植瘤抑制作用的研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 1、构建人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型； 2、观察重组ANXAl0过表达慢病毒对HepG2裸鼠皮下移植瘤体生长情况 的影响及其对移植瘤细胞中基质金属蛋白酶．9 matrix metalloproteinase．9， endothelial MMP一9 、血管内皮生长因子 vascular factor，VEGF 表达 growth 的影响。初步阐明ANXAl0基因对人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤瘤体增 殖、凋亡的影响及肝癌侵袭及转移相关的细胞因子MMP．9、VEGF的影响。 方法： 1、制备浓度为1×10 7个／ml的HepG2细胞悬液，取0．2ml细胞悬液注入裸 鼠右侧腋下。24天后，瘤体最大直径长至1．7．2．0cm时，取出瘤体，剪成 lmm×lmm×lmm大小组织块，分别接种至24只雌性裸鼠右侧腋窝皮下，每3 天测量瘤体大小，计算瘤体体积。 2、组织块移植后7天，瘤体直径长至0．3．0．5cm时，将裸鼠随机分为3组， 分别命名为实验组 LV．ANXAl0组 、阴性对照组 空载慢病毒组 、空白对 照组。每只动物给予慢病毒量为2×10 7TU 100u1 ，空白对照组给予等量的PBS； 3h后重复注射一次。4周后处死24只裸鼠，并取出裸鼠皮下瘤体。采用RT．PCR 在分子水平检测ANXAl0基因mRNA的变化，采用免疫