猪瘟兔化弱毒疫株cdna分子克隆与嵌合分子克隆的构建.pdfVIP

摘要 swine s、)l，i舱f曲er 猪瘟(classical6wer，CSF)是由猪瘟病毒(classical vims，CSFV)引起猪的一种高度接触性和致死性传染病，以发热和出血为主要 特征，世界动物卫生组织将其列为A类16种法定传染病之一。猪瘟的流行给 cholcra 世界养猪业的发展和贸易造成了巨大损失。猪瘟兔化弱毒疫苗(hog Iapinizedvi兀Is，HcLv)是我国自主研制成功的有效疫苗，在猪瘟的防制中发 挥了巨大作用，但由于疫苗接种猪与自然感染猪不易从血清学上予以区分，不 利于猪瘟的净化和消灭，研制标记疫苗有助于解决这个问题。 本研究旨在构建HcLv基因组全长cDNA克隆，以建立猪瘟病毒反向遗传 操作平台。参照已发表的猪瘟病毒基因组序列，设计合成了覆盖全基因组的9 对引物，经过RT．PCR、克隆、测序、拼接，获得了HcLv全基因组序列 全序列比较分析发现，HCLv基因组在遗传学上是相当稳定的。将9个片段分 因组置于cMV启动子控制之下)等一系列猪瘟病毒嵌合分子克隆。这些分子 克隆和嵌合分子克隆为研究HcLV致弱机制和标记疫苗奠定了基础。 关键词：猪瘟病毒；猪瘟兔化弱毒；全长cDNA克隆；反向遗传学系统 Abstract Cl嬲sicals、^，ine iscausedclassicalswinefeVer t’ever(cSF)，whichby Vims a oftenf．atalViraldiseaseof ischaracterized (CSFV)，ishighlycor妇百0us趾d pigs．n f曲er锄d classi：fiedasanOIElistA to byhigh h锄orrhages，舭d disease．Greatlosses havcbeen c棚edme of of pigindlls时worldwidc by prevalenceCSF，especially cholera nontypicalfornls．Hogl印irli乃cdvims(HCLV)(alsoI【Ilown髂C—s舰岫，a safe锄de伍caciousVaccme in h嬲been a mlein Very deVelopedCllilH playingkey t}圮controlofmedisease．HoweVervaccinatedthis pigs by vaccinecaIlIlmbe cSFvin矗∞ted dis血guished舶m讯l岣pepigsby convemiona王serologicalassays． ofmarkerVaccincs tosolVetllis Developmem may help problem． to 11lis aims cloneofHCLVtoestablisha study consmlct血e血ll-1eng血cDNA rc