王镜岩生物化学遗传密码精要.pptVIP

(七) 核糖体反应中GTP的作用：肽链合成延伸反应中的进位和移位 在A/P，E/P等符号中，分子部分代表其位置在50S亚基，分母部分代表其位置在30S亚基。 EF-Tu和EF-G的结构：EF-Tu的三个结构域分别用红，绿和淡蓝色表示，淡紫色表示。 tRNAEF-G-tRNA的结构与EF-Tu-tRNA相似，二者竞争核糖体上的同一个结合部位。 2个tRNA(L形管状)在延伸反应中的位置：tRNA的反密码环指向小亚基的裂缝(mRNA从此处穿过)，氨基酸臂相互靠近，在蛋白质合成过程中，tRNA既可绕氨基酸臂旋转，也可绕反密码臂旋转。黄色区域是氨酰-tRNA和延伸因子进入的位置。 (八) 翻译的终止需要释放因子和终止密码子的参加 RF1识别UAA和UAG，RF2识别UAA和UGA，RF3协助二者起作用。 核糖体循环 原核生物的转录翻译同步进行 多聚核糖体的电镜照片 色氨酸操纵子可以表达多种蛋白质 三. 真核生物肽链的合成 真核生物mRNA的结构 （一）真核生物肽链合成的特点 真核生物肽链合成的起始分为3个阶段。 eIF4G 是结合eIF4E:帽子复合物的多功能接头 polyA结合蛋白 eIF-2活性的调节 在真核生物中，促进氨酰-tRNA进位的延伸因子只有一种EFT1，促进移位的为EFT2，真核生物的肽链合成终止只需要一种终止因子RF。 不可用 （二）肽链合成的抑制剂 四环素族（金霉素、新霉素、土霉素）：作用于30S和40S亚基，阻碍tRNA与小亚基结合，易进入细菌，不易进入哺乳类细胞； 链霉素、新霉素、卡那霉素：作用于30S亚基，抑制启动，造成误译； 氯霉素、林可霉素、红霉素：作用于50S亚基，抑制转肽酶，妨碍移位； 白喉毒素:修饰EFT2的氨基酸，强烈抑制真核生物蛋白质的合成； 蓖麻蛋白:的B链与细胞结合，使A链进入细胞，作用于60S亚基，抑制EFT2的作用，天花粉蛋白、肥皂毒素、苦瓜素的结构与EFT2的A链相似，作用机制与蓖麻蛋白类似； 嘌呤霉素:可以阻断氨酰-tRNA的进位； 放线菌酮:抑制真核生物蛋白质的合成； 天门冬酰胺酶:分解天门冬酰胺，抑制蛋白质合成，可用于治疗白血病； 干扰素:可以活化一种蛋白激酶，使eIF2磷酸化，抑制蛋白质合成，还可以活化核酸内切酶，分解病毒的mRNA, 因而有抗病毒作用，同时，可以活化T细胞，有一定的抗肿瘤作用。 氯霉素 环己亚胺或放线菌酮 红霉素 梭链孢素 四环素 链霉素 嘌呤霉素 酪氨酰-tRAN 硫链丝菌肽 * 第37章 遗传密码 （一）mRNA的发现 1.1948年有人报道，当噬菌体感染了细菌后会产生一种很不稳定的RNA，且大多数是和核糖体结合在一起的。 2.Brenner, Jacob等人用13C，15N标记蛋白质，用32P标记核酸的方法证实了这是一种新的RNA分子，命名为信使RNA, 即mRNA (m, messenger)。 3.1961年，Spielman创造了分子杂交法，通过32P -mRNA-DNA杂交分子证明了mRNA的存在。 一、遗传密码的研究历史 （二）遗传密码的破译 1953年 Dounce假设DNA通过RNA将信息传给蛋白质，RNA上每三个核苷酸形成一个“ 空洞”，正好将一个氨基酸装进去。该假说允许三联体的重叠。 1954年 物理学家Gamow与Teller等人合作，提出三联体不可重复。 1957年 Crick也提出了三联体的假说，提出要解决“天书”的“词法” 和“句法”，必须要有一本标准词典，认为64种组合中的44种是 “简并密码”。 1961年 Nirenberg, Matthaei Ochoa开始用生物化学手段破译密码，得到20种氨基酸的密码子的核苷酸序列。 1964年 Khorana合成了U和G交替的多聚核苷酸，合成的肽为VCVCVC，后来合成了UUGUUUGUUG…产生了poly(L), poly(C)和poly(V)，由此确定了一些密码子的核苷酸序列。 1964年 Nirenberg用合成的三联体与tNRA进行密码子－反密码子的碱基配对，并与核糖体结合，使密码破译的速度大大加快。 1966年 遗传密码的破译工作基本结束，Crick绘制了密码表，提出了摆动学说（wobble concept)，及时收回了“同义词”不存在的假设。 过滤结合分析破译遗传密码 二、遗传密码的基本特性 1.密码为三联体，不重复，不间断。 2.密码的简并性 3.密码的变偶性 4.密码的通用性和变异性 5.密码的防错系统 密码子在密码表中的分布有一定的规则，通常，密码子的第二位决定氨基酸的极性，