Ti质粒及在植物遗传操作中的应用.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing) 7(6)：41--451985 Ti质粒及其在植物遗传操作中的应用 贾 敬 芬 （兰 州 大 学 生 物 系） 根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)感 生质体与农杆菌的原生质球 S（pheroplast)融 染双子叶植物的受伤组织能引起冠瘦瘤(crown 合r3［技术也已经得到一定频率的转化细胞。经 gall).这是一种严重危害植物生长的病害 癌（ 过选择培养可以得到肿瘤组织，甚至有分化现 症）。已知有90多科600余种的双子叶植物能 象。 这些实验若能在更多的植物上获得成功， 感染这种疾病r0单子叶植物和裸子植物对此 将为单细胞水平的遗传转化提供可行的手段。 病很不敏感，只少数感染的实例。根癌农杆菌 肿瘤组织无论从何种组织、用何种技术诱 含有一类诱瘤质粒，即Ti质粒(Tumorinducing 导而来，均具有一些正常植物组织所没有的特 plasmid),Ti质粒上带有致瘤基因。在诱瘤期间， 性。这表现在进行组织培养时不需要外源植物 Ti质粒的一段DNA能整合到植物细胞核中， 激素就能生长，因为它们自身能合成不同的内 而使植物细胞发生转化，成为肿瘤细胞。因此 源激素。肿瘤细胞能合成一类叫冠瘦碱(opine) 冠廖瘤是一种天然的“遗传工程系统”，又是研 的精氨酸衍生物。常见的冠廖碱主要有章鱼碱 究原核细胞DNA在真核生物中表述的一个模 (octopine）和胭脂碱 (nopaline),属章鱼碱类的 式系统，极受分子遗传学家的注意，成了植物遗 还有章鱼肉酸 o（ctopinicacid)、来苏平碱 (lys-o 传操作中深人研究的重要对象。有关冠寥瘤发 pi:ae)和组氨碱\iat.u:otstPvopniiiaC0/\。属胭脂碱类的还有 生的分子生物学概况最近已有详细综述E2,3,410 胭脂酸 n（opalinicacid）和鸟氨碱(ornaline)。在 人们期望MVI分子遗传学技术对 Ti质粒加以 自然条件下，根癌农杆菌能分解冠窿瘤的这些 改造，去除对植物有害的致瘤基因，但仍保留转 特异产物，作为唯一的碳源和氮源来利用。诱 化功能，使它成为遗传工程的载体，将外源基因 导合成章鱼碱类的菌株只能利用章鱼碱，而不 引人植物细胞，以达到改造植物并创造新植物 能分解利用胭脂碱。而诱导合成胭脂碱的菌株 类型的目的。近几年来在这一方面取得了巨大 则只能分解利用胭脂碱。由于农杆菌从宿主那 的进展。 里得到了好处，所以称此现象为 “遗传殖民地 化”(geneticcolonization)。肿瘤组织产生冠痪碱 冠瘤瘤的诱发和特性 的类型取决于细菌类型，而与宿主植物无关。此 在整体植株上诱发冠瘦瘤是一个相当简单 外，冠瘦瘤在形态上变异很大，光滑和粗糙的程 的操作过程。一般在幼年植物茎的下部 根（、叶 度不同。分化能力很微弱。有的不能分化。有 部分亦可）切割一个不大的伤口，接种上新培养 的能分化成丛生的芽，很难形成主茎，这种类型 的致病菌，在适当温度下，一个月内就可以长出 叫畸胎瘤 (teratoma)。如果将这种芽嫁接在正 一团不规则的帽状组织，即冠瘦瘤。通常用来 常植株上，它们可以发展成表型恢复的植株。冠 作诱发肿瘤实验的植物有：番茄、向日葵、烟 痪瘤的上述特性都是由 Ti质粒上的基因和宿 草、马铃薯、落地生根以及胡萝 卜等。用原生质 JiaJingfen:Ti-plasmid and ItsApllicatianinthe 体再生新壁的单细胞和农杆菌共保温[5-87或原 GeneticManipulationofPlant ．41 主特性所决定的。 型，Ti质粒可分为3类，即章鱼碱型，诱导合成