抗上皮细胞生长制因子对膀胱癌细胞中c-jun与hb-egf的影响.pdfVIP

六、附录 综述………………．．：………………………………………………………………………………………19 致谢…………………………………………………………………………………………………………28 个人简介…………………………………………………………………………．29 ·中文论著摘要· 抗上皮细胞生长抑制因予对膀胱癌细胞中c-jun与 HB．EGF的影响 目 的 Factor，APF)是一种由9个氨基 抗上皮细胞生长抑制因子(Antiproliferative 酸与半乳糖相连的小分子量、热稳定的唾液酸糖多肽，它含有Frizzled8的跨膜片 段，主要存在于间质性膀胱炎患者的尿液中，具有强烈的抗膀胱上皮细胞生长的 作用，同时发现其具有抗膀胱肿瘤细胞生长的作用，尤其对T-24细胞(膀胱癌细 胞)。AP．1在肿瘤形成及发展过程中，通过促进细胞增殖、抑制分化、促进肿瘤 细胞的侵袭和转移等过程发挥作用。APF作用于正常膀胱上皮细胞后，其c-jun 的水平明显下降，从而导致活性蛋白．1(Activator Protein．1，AP．1)的整体水平下 降，其活性降低，AP．1调节靶基因的表达，包括细胞增殖、分化、炎症、宿主反 应和恶变，而AP．1的活性降低则影响了抑癌基因P53及细胞周期调控基因P21 (P2lWAFl／CIPl)基因蛋白的表达，从而使细胞生长及增殖受到抑制，细胞则出 现凋亡或死亡。HB．EGF在多种组织和细胞中表达，如血管内皮细胞、骨骼肌细 胞、膀胱上皮细胞、角质细胞和肿瘤细胞等，对多种细胞具有促分裂增殖的作用。 HB．EGF对膀胱肿瘤细胞具有较强的促其增生的作用，而APF具有强烈抑制 HB．EGF功能和分泌的作用，从而抑制膀胱肿瘤细胞生长及增生。通过四唑盐比 APF对膀胱癌细胞生长及增殖影响；通过Westernblot方法检测不同浓度的有活性 对膀胱癌细胞生长及增殖的影响。 方 法 培养膀胱癌细胞T-24细胞系，将有活性APF及无活性APF取不同浓度分为 实验组和对照组，作用于膀胱癌T-24细胞。通过MTT用酶联免疫检测仪OD490nm 处测量各组的吸光值来检测膀胱癌细胞增殖率；通过Western blot方法得到c-jun 与HB．EGF的电泳图像，根据电泳图象所得条带的宽度和亮度进行半定量分析来 检测APF对膀胱癌T-24细胞中c-jun与HB．EGF蛋白表达的影响。 钴 甲 耋日7R M丌得出结果用酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值，显示随着 有活性APF浓度的增加，OD490nm处吸光值明显减低，其吸光值减低有统计学 意义(尸O．05)；而加入无活性APF吸光值无明显变化，与实验对照组比较无统 计学意义(尸o．05)。根据电泳图象所得条带的宽度和亮度进行半定量分析，显示 统计学意义(胗0．05)。 结论 停滞，APF作用细胞后，其e-jun的水平明显下降，从而导致AP一1的整体水平下 降，其活性降低，则影响了抑癌基因P53及细胞周期调控基因P21基因蛋白的表 达，从而抑制了膀胱癌细胞的生长及增殖，同时也能影响HB．EGF的表达，且随 着有活性APF浓度的增加，对两者的抑制作用增强，从而增强对膀胱癌细胞生长 及增殖的抑制作用。而无活性的APF并不能影响e-jun与HB．EGF的表达，也对 细胞的生长无抑制作用。提示APF对治疗膀胱癌患者具有重要的价值，是治疗膀 胱癌的一条新途径。 关键词 抗上皮细胞生长抑制因子； 膀胱癌； 活性蛋白．1； 肝素合成的上皮生 长因子 2 Frizzled8transmembrane ininterstitialtheurineof