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- 2016-11-02 发布于安徽
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家鸡染色体的制备及组型观察.pdf
遗传 HEREDITAS(13eijing) 3(1、· 17-191981
家鸡染色体的制备及其组型观察’‘
程光潮 吴丽城
(中国科学院遗传研究所,北京)
长期以来,对鸡的染色体数目、微小染色体 释)染色0.5-1小时,冲去染色液,自然干燥,
数目和结构、雌性W 染色体的结构和性质等问 镜检观察。
题一直是有争论的。六十年代以后,通过一系 2.从羽髓制备染色体 给孵化 17天 以
列的工作,对下列三个问题似乎明确了:家鸡 后的鸡胚囊或初生雏鸡腹腔注射秋水仙素50
的染色体 2n=78;微小染色体和大染色体在 微克/只。2-3小时后拔取初级飞羽斗一5根,
结构、性质和遗传行为上没有本质不同;雌鸡的 以弯头镊子挤出羽髓置于表面皿中 每(根羽髓
性染色体为ZW 雄(性为ZZ)[41。但意见还不是 约得半固体状羽髓 1mm)。加人4-5滴0.25多
完全一致的。近些年来,不少作者进一步把超 胰蛋白酶,在20-25℃ 下消化 15分钟。用吸
微技术、染色体分带技术、人工诱变技术、放射 管吸取3-4ml0.85多的生理盐水,然后把细胞
自显影技术等用于禽类染色体研究[1,8,91,使家 悬液反复吸入离心管中,1000转/分,离心10
禽细胞遗传学的研究进到更深人的阶段。 分钟。弃去上清液,加入3-4ml0.45多柠檬酸
禽类染色体的研究在国内迄今未见报道, 钠液低渗 15分钟,然后固定、制片、染色 (同骨
为促进这方面工作的开展,本文介绍我们试验 髓法)。
的家鸡染色体的制备及其组型的观察分析。 3。从胚胎组织制备染色体 给孵化 16-
18天的鸡胚囊中注射秋水仙素50微克/只,
一、家鸡染色体的制备方法 2-3小时后取胚胎的内脏组织 脾(、肾、肝等),
从羽髓、骨髓、胚胎组织和外周血培养都能 分别置表面皿中,剪成碎块。 各滴人5-6滴
得到比较好的染色体制片。我们参照 Shoffner 0.25务胰蛋白酶,在20-25℃下消化 15分钟,
等的方法[2-[s1,经过试验改良,分述如下: 然后加入少量 0.85多生理盐水,用小型组织匀
1.从骨髓制备染色体 给 10日龄 以内 浆器把组织研成匀浆。用4-5ml生理盐水冲
的雏鸡腹腔注射秋水仙素 (2微克/克活重), 洗成细胞悬液,移人离心管中,1000转/分,离
2-3小时后杀鸡取胫骨,剔净皮肉,切去胫骨 )}N10分钟。加0.45多柠檬酸钠液低渗 15-20
两端。以注射器吸0.85多生理盐水 3-4ml冲 分钟。以下固定、制片、染色均同骨髓法。
击骨髓,置离心管中,1000转/分,离心10分 斗.外周血培养制备染色体 以浓度为
钟。弃去上清液,加0.45 柠檬酸钠液5ml, 50国际单位/ml的肝素抗凝剂湿润注射器管
370C下低渗 10-15分钟,1000-1500转/分, 壁,然后从鸡翅下静脉采血 5m1,连同 0.1m]
离心10分钟,弃去上清液,加入甲醇一冰醋酸
(3:1)混合液固定2次 不(短于0.5小时),然后 ChengGuangchaoetal.:ChromosomePreparations
同以上转速进行离心。留1ml左右制成细胞悬 inChicken(Gallusdomesticus)andItsIiaryotype
Analysis
液,取2滴滴于冰冷的洁净载片上,微火干燥。 1)感谢郭爱朴同志在技术上给予帮助。段章雄同志参加
以1:9的 Giemsa液 U(H7.4 的磷酸缓冲液稀 数据计算,张婷同志参加部分工作。
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