aktmtor号途径与鼻咽癌生物学特性关系的研究.pdf

Akt／mTOR信号途径与鼻咽癌生物学特性关系的研究 Akt／mTOR信号途径与鼻咽癌生物学特性关系的研究 申请人：陈慧敏 导师：文卫平教授 专业：耳鼻咽喉科学 中文摘要 目的：通过调查mToR及其信号转导途径上游分子Akt、PTEN在鼻咽癌组织 细胞的表达、活化状态，分析该信号途径相关蛋白与鼻咽癌生物学特性的关系， 探讨耐roR特异性抑制剂雷帕霉素治疗鼻咽癌的可能性，为鼻咽癌的临床诊治提 供新的线索及可能的生物学指标。 方法：(1)收集经病理组织学确诊为未分化型非角化性鼻咽癌(WHO标准) 的组织标本48例、慢性鼻咽炎的组织标本42例，采用免疫组织化学及免疫荧光技 关系。(2)选用人鼻咽癌细胞系。咂2，采用M州去、流式细胞技术、细胞免疫 荧光技术调查mTOR特异抑制剂雷帕霉素对CNE2细胞增殖、细胞周期及细胞凋 亡的作用，并观察其对mTOR、Akt活化状态的影响。 结果： (1)48例未分化型非角化性鼻咽癌和42例慢性鼻咽炎组织中p-mTOR阳性表 达率分别为89．58％和45．24％，差异有统计学意义。鼻咽癌组中p．mToR核阳性率 为74．42％(32／43例)。p-mTOR免疫反应主要分布于肿瘤细胞的胞浆及胞核， 间质内可见散在阳性的炎性细胞，部分样本p-mTOR的免疫反应仅定位于肿瘤细 胞的胞核，胞浆呈阴性反应。随着原发灶分期及临床分期的进展、淋巴结转移的 发生，鼻咽癌组织中的p-mTOR表达强度增高；而随着原发灶分期、临床分期的 进展，p-mTOR核阳性率增高。 (2)48例未分化型非角化性鼻咽癌和42例慢性鼻咽炎组织中Akt阳性表达率分 Akt／mTOR信号途径与鼻咽癌生物学特性关系的研究 无统计学意义。 内活化存在不依赖于Alct途径。 O)MTT法显示不同浓度、不同作用时间的雷帕霉素对鼻咽癌细胞株CNE2无 明显增殖抑制作用。流式细胞术检测可见不同浓度雷帕霉素对CNE2无明显诱导 凋亡及细胞周期阻滞作用。 (5)细胞免疫荧光标记显示，CNE2细胞株的所有细胞均表达p-mTOR，阳性 产物主要定位于细胞核，雷帕霉素对p-mTOR的表达及分布特征无明显影响。 CNE2部分细胞表达p-Akt，定位于胞浆及胞核，且以胞浆为主。雷帕霉素对其 表达有抑制作用。PI染色显示，在雷帕霉素处理后凋亡细胞无明显增加。 结论： 1．mTOR名E未分化型非角化性鼻咽癌中存在过度活化，并与原发灶分期、淋巴 结转移及临床分期密切相关，提示mTOR的活化可能参与了鼻咽癌生长及发 展的调节。在I临床上，mTOR的过度活化，有可能作为辅助判断鼻咽癌临床 分期及肿瘤转移的重要生物学指标。 2．鼻咽癌组织细胞mTOR的活化存在P13K／Akt依赖及非依赖途径，胞核内 p-mTOR的表达可能与P13K／Akt通路无关。 3．鼻咽癌细胞核内mTOR的活化不被雷帕霉素所抑制，其可能是雷帕霉素不敏 感或耐药的基础。 关键词：鼻咽癌；roTOR；活化；雷帕霉素； ．n． Akl／mTOR信号途径与鼻咽癌生物学特性关系的研究 Ak“mTOR andthe The between relationship pathwaybiological characteristicof carcinoma nasopharyngeai Name：HniminChela Wen Supervisor：Pro．Weiping Major：Otolaryngology ABSTRACT